小中大关于沉淀,你看一下其他方法(比如一步法试剂盒)对比一下就可知道,异丙醇是沉淀RNA,乙醇沉淀DNA,如果你用TRIZOL,乙醇沉淀时见有白色沉淀,那是DNA,我们用此沉淀跑过电泳,是一条很亮的DNA带。
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错误的说法,希望大家不要轻信,自己查一下分子克隆上的异丙醇和乙醇的区别。我凭记忆:两者都可以沉淀核酸(DNA和RNA),只不过所用体积不一样,异丙醇所用体积小,是和上清等体积,乙醇要2或2.5倍,而且分之克隆上我似乎记得还说异丙醇容易沉淀盐,在没有体积限制时,一般不用,而用乙醇,TRIZOL提取过程中似乎没多少盐离子在里面。也许你跑的电泳有问题,我们跑RNA有时变性不好而且有杂质时,电泳图上就会显示孔里很亮,变性好了,同样的RNA样品就出现了明显的28S、18S带。另外,你提的RNA一直有DNA污染,可能TRIZOL的pH值有问题,DNA在酸性条件下易溶于有机相,这是TRIZOL提取过程中加氯仿离心后DNA在中间相和下层有机相中,但是理论上和实际上上层水相都是有DNA的,只不过很少(pH对的情况下)。要真正去DNA污染,就要加RNase free 的DNase,这是很多论文里写的。