小中大【转载【讨论】 石墨炉原子吸收光谱法测定血清中的铬
一、实验目的
1.了解石墨炉原子化器工作原理和使用方法;
2.学习生化样品的分析方法。
二、方法原理
火焰原子吸收法在常规分析中被广泛应用。但它雾化效率低;火焰气体的稀释使火焰中原子浓度降低;高速燃烧使基态原子在吸收区停留时间短。因此，灵敏度受到限制。火焰法至少需要0.5～1mL试液，对数量较少的样品，产生困难。因此，无火焰原子吸收法迅速发展，而“高温石墨炉”(HGA)原子化法是目前发展最快、使用最多的一种技术。
“高温石墨炉”利用高温(～3000℃)石墨炉，使试剂完全蒸发、充分原子化，试样利用率几乎达100%。自由原子在吸收区停留时间长，故灵敏度比火焰法高100～1000倍。试样用量仅5～100μL，而且可以分析悬浮液和固体样品。它的缺点是干扰大，必须进行背景扣除，且操作比火焰法复杂。
用“高温石墨炉”法测定血清中痕量元素，灵敏度高，用样量少。为了消除基体干扰，采用标准加入法或配制于葡聚糖溶液中的系列标准溶液。
三、仪器设备与试剂材料
1.仪器：WFX-110或WFX-1F2B型石墨炉原子吸收光谱仪
2.试剂：
0.1000mg∙mL-1铬标准贮备液：称取0.3735g在150℃干燥的K2Cr2O7溶于去离子水中，并定容于1000mL容量瓶。
20%(W/V)葡聚糖溶液。
四、实验步骤
1.标准系列溶液的配制
(1)由0.1000mg∙mL-1铬标准储备液逐级稀释成0.100μg∙mL-1铬标准溶液。
(2)在5个100mL容量瓶中分别加入0.100μg∙mL-1铬标准溶液0.00, 0.50, 1.00, 1.50, 2.00mL和葡聚糖溶液15mL，用去离子水稀至刻度，摇匀。
2.按仪器操作方法，启动仪器，并预热20min，开启冷却水和保护气体开关。
仪器条件：
波长：357.9nm
缝宽：0.7nm
灯电流：3mA
干燥温度：100～130℃
干燥时间：40s
灰化温度：1100℃
灰化时间：30s
斜坡升温灰化时间：120s
原子化温度：2700℃
原子化时间：4s
清洗温度：2800℃
洗清时间：2s
进行背景校正，进样量50μL。
3.测量
(1)标准溶液和试剂空白：调好仪器的实验参数，自动升温空烧石墨管调零。然后从稀至浓逐个测量空白溶液和标准系列溶液，进样量50μL，每个溶液测定3次，取平均值。
(2)血清样品：在同样条件下，测量血清样品三次，取平均值，每次取样50μL。
4.结束
实验结束时，按操作要求，关好气源、水源和电源，并将仪器开关、旋钮置于初始位置。
五、数据处理
1.绘制标准曲线，并由血清试样的吸光度从标准曲线上查得样品溶液Cr的浓度。
2.计算血清中Cr的含量(μg∙mL-1)。
六、问题讨论
1.在实验中通Ar气的作用是什么?为什么要用Ar气?
2.配制标准溶液时，加入葡聚糖溶液的作用是什么?若不加葡聚糖溶液，还可用什么方法?
