小中大【转帖】反相色谱法用的乙腈和甲醇的区别
1． 分离（洗脱）的选择性---两者的差异
乙腈和甲醇在分离的选择性上不同。这是由于有机溶剂分子的化学性质（甲醇和乙醇是质子性，乙腈和四氢呋喃是非质子性）不同所至。
因此，在用乙腈类不能获得分离的选择性时，就试用甲醇类。
2．峰形---有时出现差异。
像水杨酸化合物（在邻位上具有羧基或甲氧基的苯酚化合物）等，用乙腈类时拖尾大，用甲醇类可抑制。这是由于（1）对于硅表面与目标成分的相互作用（附着）的流动相的有关，因有机溶剂分子的化学性质不同而已；（2）对处分溶解能力的不同所致。
可是，一般情况下，聚合物类反相柱，与硅胶柱相比，更具有峰形宽的倾向。特别是用聚苯乙烯柱分析芳香族化合物等时常见。这在流动相是甲醇时非常明显，而用乙腈就不明显。为此，用聚合物类反相柱时建议采用乙腈类。这是因为乙腈使凝胶膨胀。
3． 流动相的脱气---乙腈类要注意
混合溶剂的置制，不说在LC装置内，只谈预先在流动相瓶内进行时（等浓度系统）。
甲醇与水混合时发热，多余的溶解空气较易变为脱出气泡（脱气容易）；而乙腈由于吸热冷却，随着慢慢回到室温，产生气泡。所以要考虑脱气（加温搅拌，过滤膜等）。
4．结论
以上反相色谱法流动相常用的乙腈和甲醇进行了比较。粗略地讲是“使用乙腈HPLC级最好。在选择性，峰形差时用甲醇HPLC级”。但是根据各种不同性质设计分析条件也是有必要的。
