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标题:【求助】同一瓶中样品包含三个峰，其中只有一个峰的RSD...

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发表于 2016-1-29 10:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】同一瓶中样品包含三个峰，其中只有一个峰的RSD...


峰#          保留时间        面积        高度        分离度        理论塔板#        拖尾因子
1        3.112        3328028        556365        --        5894.906        1.632
2        4.228        30394        1274        2.771        690.894        1.018
3        8.216        435032        35474        8.275        10528.851        1.177
4        11.871        774720        41147        8.988        9280.595        1.113
1        3.115        3327790        554883        --        5815.766        1.632
2        7.385        33987        1369        10.368        2000.917        0.998
3        8.221        431298        35519        1.705        10524.436        1.176
4        11.892        837697        42648        8.934   9007.198             1.124       
1        3.113        3306971        553591          --        5921.944        1.627
2        7.724        19212        970        13.392        3439.912        0.804
3        8.223        433950        34892        1.182        10743.624        1.17
4        11.908        739381        38883        9.091        9317.469        1.121
1        0.836        31336        661              --        7.128        0.989
2        3.103        3356422        558930        3.203        5840.435        1.638
3        7.351        34798        1385        10.191        1919.064        0.954
4        8.215        436615        35547        1.741        10481.26        1.177
5        11.91        804900        42426        9.06        9272.67        1.119
1        0.371        14194        411        --        2.527        1.442
2        3.105        3358006        556925        4.994        5847.91        1.64
3        6.92        36607        1430        9.042        1650.176        0.99
4        8.217        439512        35513        2.587        10444.783        1.181
5        11.92        830292        43692        9.061        9252.29        1.116



三个主成分峰的相对偏差分别为：0.65%   0.70%   5.10%
为什么第三个峰和变动会这么大，前两个峰变动确不大呢？
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发表于 2016-1-29 10:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
前几个组分没有问题，应该不是仪器硬件问题。

您做什么物质的分析，三个组分都是什么？
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发表于 2016-1-29 10:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

首先声明。我对这个问题的回答只能作为一种现象“解释”，而不能一种答案。原因是楼主给出的数据比较少、对样品的理化性质不清楚，对实验条件不清楚。
如果楼主找出真正原因或者其他色有有过类似经历并知道原因，希望能到这里说明一下。

下面是我给出的“解释”。

我觉得楼主遇到的问题主要有两方面因素：

1、样品稳定性问题。从数据上分析，我认为2号峰和3号峰之间可能存在一种类似相互转化的问题。

2、可能存在进样残留的问题。
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发表于 2016-1-29 10:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

对楼主给出的数据进行整理和计算得到：
保留时间        面积               
3.112        3328028               
8.216        435032        0.130718       
11.871        774720        0.232787        1.780835
3.115        3327790               
8.221        431298        0.129605       
11.892        837697        0.251728        1.94227
3.113        3306971               
8.223        433950        0.131223       
11.908        739381        0.223583        1.703839
3.103        3356422               
8.215        436615        0.130083       
11.91        804900        0.239809        1.843501
3.105        3358006               
8.217        439512        0.130885       
11.92        830292        0.247257        1.889122
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发表于 2016-1-29 10:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用2号峰面积除以1号峰面积得到以下数值：
0.130718、0.129605、0.131223、0.130083和0.130885，这5个数据不用做统计，差异性很小。（rsd=0.44%）
用3号峰面积除以1号峰面积得到以下数值：
0.232787、0.251728、0.223583、0.239809和0.247257，这5个数据的之间的相对标准偏差达到4.21%。

这个两个分析，相当于内标法的分析。把1号峰当作内标物看待，如果三种组分的不会发生相互转化那么，上述两组数据处理将会得到比较小的相对标准偏差，而且两组数据的RSD基本会处于同一水平。

但，从得到的数据看，此种假设是不成立的。说明三种组分中很可能存在相互转化或者类似情况。
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发表于 2016-1-29 10:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
3号峰面积除以2号峰面积，得到以下数值：

1.780835、1.94227、1.703839、1.843501和1.889122，这5个数据之间的相对标准偏差为：rsd=4.54%。

5楼主分析到，可能存在3种组分的相互转化。共存在4种转化类型，即1和2之间，1和3之间，2和3之间和1、2、3之间。

最后一种情况比较复杂，只分析前3种情况。在前3种情况中，如果发生转化必定会出现“此消彼长”的现象，这是重要前提。

2号/1号数值变化小，3号/1号数值变化大，说明3号峰在变化，又由于3号/2号的rsd>3号/1号的rsd，说明组分的转化放生在2号峰物质和3号峰物质之间。

至此得到的我给出的解释的第一条：即样品组分可能不够稳定。
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发表于 2016-1-29 10:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
验证第一条结论：

如果样品组分存在相互转化的情况，则必定会出现“此消彼长”的现象。可以把特定峰在5针中的峰面积大小做排序。但是在排序前先做除权处理，以消除不同进样之间的差异。数据如下：
时间             面积               5针             4针
3.112        3328028        　        　
8.216        435032        3        3
11.871        774720        2        2
　        　        　        　
3.115        3328028        　        　
8.221        431328.8        1        1
11.892        837756.9        5        4
　        　        　        　
3.113        3328028        　        　
8.223        436713.2        5        4
11.908        744089        1        1
　        　        　        　
3.103        3328028        　        　
8.215        432921.4        2        2
11.91        798090.9        3        3
　        　        　        　
3.105        3328028        　        　
8.217        435588.3        4        　
11.92        822879.7        4        　


经过除权处理，1号峰的面积都处理成和第一针1号峰面积相同的情况。把2号和3号峰的面积按着从小到大排列。
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发表于 2016-1-29 10:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
通过对5针的排列。如果呈现“此消彼长”的态势，理论上每一针的2号峰序号和3号峰序号的和应该相等，即等于6。看7楼数据，只有第2针符合。偏离最大的是第5针，达到8。再仔细看一下第5针，1号峰，和2号峰均是这针最大（3号峰也较大，但是由于2、3号转化中3号峰变化幅度要大，所以不做分析），很可能说明在这针存在偶然因素，最有可能的就是进样口残留等因素，因为这样的偶然因素不会像进样量误差那样引起等比变化。

验证：去除第5针排列前4针。得到了和理论上一致的代数和为5的情况。

所以得出我在第三楼给出的解释。

再次说明，这只是一种解释。
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发表于 2016-1-29 10:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这是10药典的方法,三个主成分分别为甲硝唑,克霉唑,盐酸氯已定,氯已定也就是不稳定的那个.波长为260.流动相:甲醇水三乙胺 庚烷磺酸钠.    这是个老品种,不应存在相互影响的问题.我以做个N多次,仪器换个5台,都是这样
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发表于 2016-1-29 10:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
样品是平行处理的，还是同一个样品连续进5针？
保留11分钟的峰面积间隔性的变化，变大后变小又变大
流动相是做单通道吗？考虑样品的稳定性
PS:寒版分析的真全面，佩服！~
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