小中大个人认为提取RNA要注意几点:1)快速 尽管不要求你象百米赛跑一样快,但是也不能慢条斯理的,我们实验室的提取RNA的时候凡是离心的时候都是小跑进行的(因为离心机和操作台不在一个实验室),从取组织加液氮研磨开始到电泳检测条带都要快,最主要的目的当然还是尽量防止RNA的降解了。2)组织充分研磨 要使组织尽量研磨碎,匀浆化,这样更有利于细胞的裂解。为了尽量缩短时间,可以先用锤子先将组织锤碎,然后赶快加液氮,研磨,然后尽快加裂解液。匀浆化后室温静置的时间要足够,这样核蛋白复合物才能完全解离。3)操作要严格 尽量戴好口罩、帽子,每次操作的时候都尽量戴上手套,下一步操作的时候换一个手套,这样最大程度地避免RNA酶的污染。4)尽量离心都在低温离心机操作,但是如果你的操作够快,个人觉得也可以在常温离心机中操作,有段时间我们实验室低温离心机坏了就经常在常温离心机中提取RNA,一样能提取的很好,还有就是操作的时候也没必要在超净台中操作,就在一般的台子上就可以了,最好在离心机旁边,这样能最大程度的节约时间。5)时间要安排合理 比如在离心的时候就要准备好下一步用的东西,在提RNA之前就要倒好胶,在最后一步离心时就要准备好电泳的loading buffer,电泳时间最好15分钟内,电压高一点170v,总之是最大程度的避免RNA的降解了,祝你成功!