PCR仪

1.相对定量的柱形图,在取对数之前,是倍数关系,去过对数之后函数关系变成什么样子,是不是还是个倍数关系,请允许我把高中知识都忘光了吧,只记得对数函数是个增函数,其他实在不能回答了.

在0线以下的表示表达量比对照组低,因此那个"-"就表示这个意思.图上确是反应的是C3>C1>C4>C2.

2.相对表达量的分析方法有两种,一种是标准曲线法,另一种就是-△△Ct法.一般来说,后者比较简便,免去很多标准品筛选的麻烦,但是这种方法是有局限性的,把扩增效率默认为1,这样才有底数为2的-△△Ct次幂这么一说.原本的底数应该是(1+E扩增效率)

您图中纵坐标的数据没有什么意义,只是一个倍比的关系,举个例子,(以未取对数前的比值为例)如果C2比C1低100倍,C3比C1高100倍,那么取过对数后,你的纵坐标就变成了正负2.

因此,这个-△△Ct与纵坐标没什么直接的关系.

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有一个问题请教：
您说图中纵坐标的数据没有意义？ 我想问下：在进行统计分析时是否可以在2-△△Ct值或者取对数后的结果（即上图）中任选一个？两者都可以说明实验结果，只是表达方法不同？

1.相对定量的柱形图,在取对数之前,是倍数关系,去过对数之后函数关系变成什么样子,是不是还是个倍数关系,请允许我把高中知识都忘光了吧,只记得对数函数是个增函数,其他实在不能回答了.

在0线以下的表示表达量比对照组低,因此那个"-"就表示这个意思.图上确是反应的是C3>C1>C4>C2.

2.相对表达量的分析方法有两种,一种是标准曲线法,另一种就是-△△Ct法.一般来说,后者比较简便,免去很多标准品筛选的麻烦,但是这种方法是有局限性的,把扩增效率默认为1,这样才有底数为2的-△△Ct次幂这么一说.原本的底数应该是(1+E扩增效率)

您图中纵坐标的数据没有什么意义,只是一个倍比的关系,举个例子,(以未取对数前的比值为例)如果C2比C1低100倍,C3比C1高100倍,那么取过对数后,你的纵坐标就变成了正负2.

因此,这个-△△Ct与纵坐标没什么直接的关系.

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有一个问题请教：
您说图中纵坐标的数据没有意义？ 我想问下：在进行统计分析时是否可以在2-△△Ct值或者取对数后的结果（即上图）中任选一个？两者都可以说明实验结果，只是表达方法不同？

你好！我做的是探针法的绝对定量。对于试验后数据分析有一些疑问。看过一些文献，大都要分析ct值变异系数（包括批内和批间的）。变异系数是CT值标准偏差/CT值平均值，但是这样计算只能计算一个点或多个点的变异系数。我见别人文章中有直接评价一个试验或某次试验的变异系数，这是怎么计算的？
另，除此之外绝对定量还有什么一定要分析的方面？
望解答。

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先说一下，我用的仪器是ABI7000，做定量的时候最后会出来每个样本（包括标准品）的标准偏差，应该是stdDev吧，但是我在文献中经常看到mean intra- and inter-assay coefficients of variation (批内或批间的变异系数)用来验证一个实验的重复性。我不明白的是怎么得出整个实验变异系数的。希望楼主或是其它路过的高手能够指导一下。