小中大请教几个问题：
1，对照是另外一个孔反应还是跟你样品一个孔同时real-time? 对照怎么选？ 常用的对照有b-actin 外还有哪些？ 怎么知道哪一个对照适合自己？
2，质量好点的Realtimepcr KIT哪些公司卖？ 一般里面都有些什么东西？
3，探针的标记5', 3'一般是标什么？ 有没有其他选择？
===============================================================================================================
首先建议你看些realtimePCR的科普文章。
1。所谓的对照，大部分指的是内参，即管家基因。目前来看，管家基因的选择还是主要依赖文献。并不是所有的管家基因经过药物处理等一系列实验折腾后表达量仍然恒定，因此目前的管家基因选择一般都选国际上比较认可的。
另外，相对定量还有一个对照组的选择，即未经处理的样本。我更习惯管这种情况叫对照。
2。探针标记的选择，还是根据你的仪器，一般来说，5‘FAM都是比较通用的，淬灭集团可以选择有荧光的，更好的是选择没有荧光的。只要有良好的淬灭效果就行。
