小中大大家好
刚开始做real-time pcr什么都不懂 一头雾水
想请教几个问题 非常感谢
1 我想用taqman探针 real-time pcr 做绝对定量 ，我看好多地方都说产物要在50-150bp, 我的一个产物是273bp，我想问这个能行吗，对定量影响大吗？
2 我用的仪器是ABI step one plus，设计的两个探针是HEX-BHQ ，和FAM-BHQ, 但仪器通道里没有相应的，所以我该选VIC-NONE和 FAM-NONE ,还是VIC-TAMRA，FAM-TAMRA呢？
为什么ABI的仪器猝灭就只有TAMRA、NONE、MGB三种呢？难道设计到专利问题吗？
3 我的扩增曲线
是两个体系分别扩增的，但最终是想把两个放在同一管中做一个双重实时定量PCR的
4 rox内参的问题
我用的ABI step one 的仪器 ，但我给工程师打电话他说用rox的话曲线会很差，不推荐用。
那这个要用吗？
体系1
[ 本帖最后由 duoduo 于 2011-10-16 15:51 编辑 ]
