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标题:【求助】求实时具体PCR操作步骤

JK.jon[使用道具]
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发表于 2016-2-9 21:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】求实时具体PCR操作步骤

刚刚进入实验室，要做实时PCR，从前没接触过，不知哪位大虾有实时PCR操作步骤方面的资料，拜托各位大虾了
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yapuyapu[使用道具]
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发表于 2016-2-9 21:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

实验原理/步骤与问题分析:cuturl('http://www.bbioo.com/bio101/2006/7953.htm')
具体步骤:cuturl('http://www.bbioo.com/bio101/2006/7505.htm')
楼上要学会高效使用网络资源哦
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JK.jon[使用道具]
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发表于 2016-2-9 21:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Thanks,但我想找的是real-time PCR的操作步骤啊
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mybioon[使用道具]
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发表于 2016-2-9 21:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

real-time PCR是荧光定量PCR,而RT-PCR是逆转录PCR,二者不同.
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zbboom[使用道具]
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发表于 2016-2-9 21:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

了解一些，就来说几句
实时PCR分两步做
1、逆转录
2、在real time 仪器上跑PCR
具体的操作过程以及试剂用量，要参照你定的试剂盒
我们实验室逆转录用的是promega的黄盒子
第二步PCR用的是ABI7500仪器，sybr盒
做相对定量PCR
具体的操作过程见附件
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