【求助】因为想做LncRNA，所以需要克隆cDNA全长，... - 经验共享

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标题:【求助】因为想做LncRNA，所以需要克隆cDNA全长，...

viviwang1987[使用道具]
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发表于 2016-2-9 21:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

需要人全长lncRNA克隆可以找上海龙钱生物

fox_79[使用道具]
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发表于 2016-2-9 21:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

qPCR引物自己设计就好，最好跨外显子，TM60左右，一般都问题不大

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请问，我现在要设计的lncRNA跨了一个外显子，大小是1986bp，这么长的片段要怎么设计qPCR引物呢？有没有设计qPCR好的软件或建议呢？还有lncRNA的q引物需要特别注意那些因素呢？本人刚刚接触，望大神指点啊

bring[使用道具]
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发表于 2016-2-9 21:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我现在也开始克隆植物lncRNA全长，用的clontech试剂盒，可是更换了引物，体系条件，一直扩不出任何条带，一度怀疑其不含poly(A)，所以先5‘race，也扩不出任何条带。是从师兄荧光定量pcr扩出短片段处设引物，后来也试过别的位置设引物，但是还是没有效果。前辈有好的建议吗？

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