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标题:【求助】RT-PCR试剂盒问题

birdfish[使用道具]
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【求助】RT-PCR试剂盒问题

各位前辈,晚辈最近要做RT-PCR预实验,但不知道哪个公司的RT-PCR试剂盒好,有没物美价廉的试剂盒,晚辈查了一些资料,但不知道RT试剂盒和PCR试剂盒分开买,还是就买RT-pcr试剂盒。
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birdfish[使用道具]
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我做RT-PCR,在PCR这一步,扩增目的基因长度为1064bp,而内对照β-actin扩增的基因长度为540bp,可以用AMV RT-PCR吗?
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gogo[使用道具]
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国内的TaKaRa的吧,formentas
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wzqzy[使用道具]
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我用过反转录酶和反转录试剂盒当选北京艾德莱生物的,非常不错,物美价廉。cuturl('www.aidlab.cn')
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yueban-1147[使用道具]
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楼上的典型广告贴吧……
建议楼主还是选用大公司的,TaKaRa的吧。产品质量可靠点。大公司的酶都是经过很多实验鉴定其纯度和活性的。
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seagate[使用道具]
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如果你那对楼主的回复也能像上面那样详尽而透彻的分析总结。我会更加钦佩你。对于楼主的求助你只用一句文理都很不清楚的话来回答,我无心的说了句你小公司你却扬扬洒洒的来了一大篇来回应,可见你把心思都用在哪里。。。我买大公司的东西是因为质量过关,而不是他是外国的。如我所说,修饰酶一般都经过5-6步纯度检测。您的公司是否能够做到。扪心自问吧,与其有在这里一争口舌之快的时间,莫不如花在把自己的产品做好做大。
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viviwang1987[使用道具]
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这是你回答楼主的话:“建议楼主还是选用大公司的,TaKaRa的吧。”我觉得这根本不回答楼主的问题,只是凭借感觉,想象,没有事实依据的说法,毫无道理。所以,我用道理和证据来说明为什么这是毫无道理的。你用想象和感觉来说明书大公司的好。我用数据和事实来证明不一定要迷信所谓”大公司“
我和你完全不一样,不管我是什么观点,我是用事实和数据来支持和说明。但是你一直到现在还是在犯同样的错误,就是没有证据和数据,信口开河,比如:“修饰酶一般都经过5-6步纯度检测”。你做过表达纯化吗?你了解商品化的表达纯化程序吗?退一万步说,你做过表达纯化,但是你知道宝生物的生产过程和质控检测过程吗?你知道我们的表达纯化质检过程吗?xx公司你眼中的大公司用摇瓶生产taq酶,我们用大规模发酵罐来表达纯化,看人数比我们大10倍,但是用的设备完全不能和我们比。如果你既没有做过商品化的表达纯化蛋白产品,也不了解别人的公司的产品和生产工艺。你这种所谓的经过5-6步纯化是怎么来的?猜的?蒙的?做梦梦见的?那你不是信口开河是啥?做过5-6遍纯化好的就一定比做过2-3遍纯化的好吗?你一看就没有做过蛋白,以为纯化次数多,就是好,其实很多蛋白生产工艺,步骤越多,对活性损害越大。大家追求的就是最少的步骤来达到目的,你懂吗?完全用一些假设的猜想的东西来当论据,要驳斥,太容易了。
顺便说一句:我们公司某些产品也给进口的“大公司”贴牌生产。宝生物也有东西也是找人贴牌生产的。比如我说宝生物核酸分离非常差,我是有证据支持的,不是和你一样信口开河的,大家要是不相信,就去对比一下宝生物的核酸分离的产品种类,你看看他有没有提前噬菌体的核酸的,有没有20分钟不用苯酚,氯仿提取棉花苹果等困难RNA的产品的,有没有一次处理10ml血液DNA的,有没有粪便,土壤DNA提取的,有没有不用苯酚,氯仿提取RNA,不用DNA酶消化20分钟可用于荧光定量PCR的RNA提取产品的?有没有不用苯酚,氯仿,提取酵母RNA的?有没有提取100kb以上超大质粒BAC/PAC的,等等,不一一列举了。我们是国内一线直接做试剂盒的公司,做了这么多年技术,全部用事实说话。我只做有事实依据的讨论,辩论。不欢迎信口开河。我想我已经完全,充分的表达了我的观点。仁者见仁,智者见智。这个帖子我不再做任何回复,有时间做好产品是王道。
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wzqzy[使用道具]
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虚心接收您的批评。我确实没有提供任何数据,只是一言带过来说明大小公司的修饰酶纯度检测问题。导至您这样的专业人员误解了我的意思,不知道那些初入门的兄弟姐妹是否看明白了纯度检测和纯化过程是不同的概念。cuturl('http://www.takara.com.cn/?action=Page&Plat=pdetail&newsid=245&subclass=1')
这是TaKaRa的网页上修饰酶纯度一览表。和您理解的完全不同,并不是纯化过程,而是检验修饰酶的Endo-,Exo-Nuclease活性;Endonuclease,Nicking活性,RNase活性等等。不知您公司是否有该项目的检测。此外,还有一点希望你能改正,就是你的言辞具有明显的人身攻击性。这会对你今后的发展不利。
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sunbent[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 birdfish 于 2016-2-10 13:27 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
各位前辈,晚辈最近要做RT-PCR预实验,但不知道哪个公司的RT-PCR试剂盒好,有没物美价廉的试剂盒,晚辈查了一些资料,但不知道RT试剂盒和PCR试剂盒分开买,还是就买RT-pcr试剂盒。 ...

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