小中大
曾经也疑惑过这个问题,现在说说自己的看法
从你的电泳图看,你所说道的冲击扇形状条带,MARKER 同样是这样的啊,可以肯定是胶的问题了,你跑了好多次,都是一样的效果应该不是琼脂糖的问题,该怀疑的就只有缓冲液了,不知道你有没有换新的缓冲液试 试,缓冲液跑的时间用的时间太长,更容易变热,且其离子浓度,PH值都会发生变化的.我曾经做过实验,新的缓冲液可以减少"变形"的力度.但是不能变的很平直,我做比较的时候,别的产物可以很平直,唯就某个产物不可以,这说明这个PCR产物的空间结构比较特异吧,具体什么原因就不知道了.
至于你孔里的亮带,应该是蛋白污染.蛋白污染的表象就是这样啊,跑不出孔,且会吸附在孔周.蛋白可能来自DNA抽提过程中,去蛋白不够完全,RT得到的CDNA同样也是可能有蛋白存在的,这与标本的处理措施及抽提的试剂及人员操作等都有关系,不要太相信花钱的就是好货哦