小中大我接下来要酶切，是一定要把目的基因前面的条带消除的。提高温度我也做了，只是温度提高后，目的基因和杂带有很模糊，什么也看不见了，很是郁闷！
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首先要确定你酶切的目的，是继续做载体连接还是不继续做了，仅仅进行酶切与否的分型。
如果是前者，估计你的样本量应该不多，控制PCR的总量和特异条带的最高亮度的条件，然后进行切胶回收就可以了。
如果是后者，可能相对样本量多一些。都采用切胶回收的方法固然不现实，那我觉得你不妨先不要着急想去除干净非特异性的条带，要想两全其美，起始显示中是比较困难的。你可以尝试用你需要的酶进行酶切，看看酶切后的残余片断是否会由于非特异性扩增而有质的影响。往往，非特异性扩增产物不能被酶切，或者酶切后残余条带明显偏离你需要关注的范围，那样的话是不干扰你进行基因分型的。如果需要回收片断的话，这个时候进行切胶也不晚。
如果确实酶切后，杂带在分子量范围和亮度上都明显干扰目的条带的话，那非常不幸，你必须仔细摸索PCR条件了。
