小中大【求助】MSP的阳性对照问题
之前都是用细胞的DNA来做BSP的,最近要做MSP,样本是人外周血DNA,阳性对照的问题,有的protocol是要先将人外周血白细胞genomic DNA酶切后用M.SSS1 酶处理得到阳性对照,有的没有酶切直接用M.sss1处理,然后NaHSO3修饰的,我的问题是:
1.到底酶切这步是不是必要的呢??
2.阳性对照的DNA一定得是白细胞的genomic DNA么?我得理解是只要这段DNA得CpG位点被甲基化后,甲基化得引物能结合扩增就可以了,不知我得理解对不?
之前做BSP,没有酶切,直接用genomic DNA做的,一样是成功的,MSP是不要要求更高,请做过的大侠指点迷津啊,谢谢了^_^