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标题:求助引物设计的战友先进来这里~~~~~~·

浆果儿cc[使用道具]
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发表于 2011-10-19 11:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
求达人指点KCNC3基因的引物设计~~~用来做普通的PCR，上DHPLC去检测突变的~~~~已经为这个头痛了一个多月了~~外显子太大了~~~~~GC含量惊人地高~~~~真的想不出怎么设计了~~~~~吐血求助啊~~~~~马上面临毕业啊~~~时间太紧了~~~~求高人指点啊~~~~~`
这个是KCNC3基因的序列
cuturl('http://www.dsi.univ-paris5.fr/genatlas/19/html/KCNC3_1.html')
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胖小妮子[使用道具]
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发表于 2011-10-19 11:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我过几天要做RT-PCR了，可是引物还一头雾水，原因是没有完整的序列，哪位大侠愿帮小妹一把啊，羊的orexin和它的受体。
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wu11998866[使用道具]
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发表于 2011-10-19 11:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
研二小硕求救，楼主，我在做甲基化方面的研究，参考了一篇国内文献:改良的甲基化特异PCR法在人宫Hela细胞检测中的应用 ，一文
发表在中国现代医学杂志 笫l6卷笫2期，2006年1月
但是我按照上面的引物序列合成 p16引物序列
野生型
pl6-WS 5’CAGAGGGTGGGGCGGACCGC3’
pl6一WA 5’CGGGCCGCGGCCGTGG3’
产物为140bp
但是我用的也是Hela细胞，提取基因组后PCR，在Genebank上比对序列同源性是100％，不过这是在mRNA序列，请问从基因组水平p，有什么区别没有？实验条件也如文献所述，为什么一直得不到预期片断，希望能够得到大家的帮助，在此实验中应该注意什么问题，怎么才能够得到目的条带的结果。
真诚期待尽快回音，谢谢
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长发piaopiao[使用道具]
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发表于 2011-10-19 11:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
求助版主：
现有一对引物，序列如下：
F：5’-ATGTTGGTCAGGCTGACTATG-3’
R：5’-GATTCCACATTTATCCTCATTGAC-3’
给推荐几个关于PCR设计的外文资料
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发表于 2011-10-19 11:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
叩请帮忙！！！

我做的是大鼠的脑缺血模型，求助PI3K的基因序列和引物设计！

请高人帮忙啊～～～
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qqq111[使用道具]
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发表于 2011-10-19 11:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
已知一个科中所包含的几个属的基因，但各属已知基因是不同的，在这种情况下可以设计属的特异引物吗？如果可以如何设计？
恳请帮助！！谢谢！！
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mimili_901[使用道具]
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发表于 2011-10-19 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我要测定红细胞CR1的基因多态性，有没有作过或知道怎么设计，要加Hind3酶切的，文献上的现成的能不能用啊？我想知道所需的DNA模板的序列？很急，如有知道的请尽快回复啊，多谢啊！
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发表于 2011-10-19 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也是做PCR的新手，也在为引物设计发愁，我从国外影响因子是3.多的期刊上查了因无序列，在primer上分析了一下， 结果还可以，我想直接拿来做P，看看结果怎么样。  
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wiwi[使用道具]
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发表于 2011-10-19 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我是新手,跟大家请教个问题.我想把我的目的片段从载体上P出来,然后连到另外我需要的一个载体上.我要在目的片段上加Sac1和Sma1酶切位点,请问保护碱基怎么加,还有怎么知道我的目的序列中没有这两个酶切位点?
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兔纸[使用道具]
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发表于 2011-10-19 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
大家好，我在做解脲脲原体分群的PCR，参考文献上的引物序列，改过很多条件一直不出目的条带，请各位高手指点一下，是不是引物有问题？
UMS-125 5-GTATTTGCAATCTTTATATGTTTTCG-3
UMA-226 5-CAGCTGATGTAAGTGCAGCATTAAATTC-3
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