【求助】普通琼脂糖凝胶电泳电流值很高（几乎与电压...

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标题:【求助】普通琼脂糖凝胶电泳电流值很高（几乎与电压...

sunnyB[使用道具]
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发表于 2016-3-3 11:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如题：
最近换了个电泳仪（北京六一），电泳时发现电流很大，如电压设到100v，电流可达90mA，60V时，电流50mA左右。更换电泳液，重新配置缓冲液都没有改善，电泳跑得似乎慢些，电泳带型无明显异常。电泳仪检测修理过。
问题处在哪？请指点。

TNT[使用道具]
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发表于 2016-3-3 11:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

是正常的.一般配1XTAE时不够严格,有时配得浓一点,电流就会增大.如果配得较稀,则电流会减小.电压与电流的比例还会受电泳槽的长宽比的影响，如果电泳槽宽固定，长度增加，则电流与电压的比会降低．否则，反之．
楼主所说的这种情况不会影响电流结果的，不过电流太高不太好，电泳液易发热，发热的胶会导致样品在胶中的扩散加快．从而使跑出来的结果不漂亮．电压与电流的比与你所购买的电泳槽的和长宽比有关（与其设计有关）

u234[使用道具]
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发表于 2016-3-3 11:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可在电泳槽周边放冰块

sunnyB[使用道具]
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发表于 2016-3-3 11:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢各位，我用的是TBE，电泳发热现象不是很明显，原来的电泳仪坏了，换了个新的才这样（电泳槽未换），电泳仪让厂家拿回去检查维修后人是这样，实在不明白，身边又没有其它电泳乙验证，郁闷！跑了n年电泳从没出现这种情况。

zhenxin[使用道具]
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发表于 2016-3-3 11:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

电压恒定时，电流强度越高，说明电阻越小～
仔细看看你的电泳槽是不是短路，或者缓冲液加得太多，或者是琼脂糖的质量问题？～～
建议试试跑胶时缓冲液低于胶的水平，看是不是电流强度还是很高，如果是的话，那就要么是琼脂糖的问题，要么是电泳槽短路了～
只能自己认真找找了～

sunnyB[使用道具]
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发表于 2016-3-3 11:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢楼上！
琼脂是西班牙生产的，以前用过的质量很好，电泳液加的量应属正常，只是EDTA是国产试剂，可以前也是用的这瓶，难道是过期失效了？TRis是进口的，
再试试，谢谢各位！

sunnyB[使用道具]
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发表于 2016-3-3 11:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

对了，电泳槽两边通电气泡正常，未发现异常，也换过电泳槽，但物改观。

xevin[使用道具]
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发表于 2016-3-3 11:46 资料个人空间短消息加为好友

小中大

很正常，我也碰到过如此情况，跟电泳仪有关。尽管做好了，对跑胶结果没有任何影响。