【求助】大肠杆菌发酵OD值问题

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标题:【求助】大肠杆菌发酵OD值问题

sobi[使用道具]
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发表于 2016-3-5 15:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

求助大神，制作重组大肠杆菌菌种，发酵。在制作种子的过程中，会用甘油保存种子供发酵使用，请问保存的时候种子的OD值为多少？

eor[使用道具]
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发表于 2016-3-5 15:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

直接刮斜面保藏就行了，干嘛用种子做甘油管保藏，用种子做甘油保藏稳定性不好吧？

HP007[使用道具]
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发表于 2016-3-5 15:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 eor 于 2016-3-5 15:32 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
直接刮斜面保藏就行了，干嘛用种子做甘油管保藏，用种子做甘油保藏稳定性不好吧？

请问斜面在多少度保藏呢？

chenshuanhe[使用道具]
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发表于 2016-3-5 15:33 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 HP007 于 2016-3-5 15:32 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

请问斜面在多少度保藏呢？

我们一般都-20度保藏，可以随时拿来用的，如果想放置时间更长些就液氮保藏。

fangxiang[使用道具]
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发表于 2016-3-5 15:33 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可以用30%甘油保存，一般在对数期，OD600为0.5.

ztonyc[使用道具]
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发表于 2016-3-5 15:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

一般对数期，就是挑去单菌落，摇瓶培养至OD0.8左右（大概5个小时），然后吸取800vl菌液加到含有50%的200vl灭菌甘油中，负80度或负44度保存，加到甘油中，要轻摇混匀。甘油终浓度一般10%，甘油浓度太高不好。

sobi[使用道具]
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发表于 2016-3-5 15:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 ztonyc 于 2016-3-5 15:34 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
一般对数期，就是挑去单菌落，摇瓶培养至OD0.8左右（大概5个小时），然后吸取800vl菌液加到含有50%的200vl灭菌甘油中，负80度或负44度保存，加到甘油中，要轻摇混匀。甘油终浓度一般10%，甘油浓度太高不好。 ...

od测方法，我们是稀释6-8倍左右，波长600直接测？我们结果都6左右，是怎么回事，是因为测的方法不同吗

sobi[使用道具]
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发表于 2016-3-5 15:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 fangxiang 于 2016-3-5 15:33 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
可以用30%甘油保存，一般在对数期，OD600为0.5.

你测OD方法有什么注意点吗？

45778[使用道具]
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发表于 2016-3-5 15:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

无所谓，肉眼浑浊就可以了。

ququer787[使用道具]
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发表于 2016-3-5 15:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

在0.5-0.8之间，大约从平板上挑取单菌落，在LB培养基中培养2-2.5小时左右；

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