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标题:[求助]脂肪组织提RNA

#黄药师#[使用道具]
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发表于 2011-10-22 17:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如何防止用Trozol 提的是RNA而 非DNA？谢谢！
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vivian4123[使用道具]
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发表于 2011-10-22 17:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
在加氯仿之前离心12K，5分钟，因该有一个上层覆盖物弃出，再吸取上清，再加氯仿，然后按说明书来就可以的！祝你实验成功！  
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#甜#[使用道具]
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发表于 2011-10-22 17:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你提不出来是你脂肪的用量可能太少了，多加一些组织在试试看吧。
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冰儿0109[使用道具]
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发表于 2011-10-22 17:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
先回答你的问题:
1.加异丙醇后离心前需静置2小时或过夜吗？
不需要!加完后轻轻晃动,混匀,然后静止5分钟即可.
2.用70%酒精还是75%的洗涤RNA？
其实我是用的75%的乙醇洗的,但我觉的70%和75%不会对实验结果产生很大的影响,它的作用应该就是洗去残留的异丙醇,
3.提出总RNA后用无酶水还是用酒精保存？
那要分组织,脂肪的保存在无酶水中即可,我没有用酒精保存过,也没听说过!不过可以保存在甲酰氨中
4.可用普通TBE缓冲液及琼酯糖跑电泳吗？TBE缓冲液用1X,琼酯糖用1%浓度，100V跑小胶的2/3,即可,你可以查一下,用甲醛变性胶,结果更好!
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（cat）[使用道具]
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发表于 2011-10-22 17:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我用最普通的方法提，没看到沉淀，但也跑出三条带了，我用的组织放在--70C冰箱里，拿出来后马上在冰上匀浆。
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