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标题:【求助】请问如何消除引物二聚体?测序需要!

tuuu2[使用道具]
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楼主可能是想要漂亮的图哦!
呵呵!
纯化纯化就可以了!
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pou[使用道具]
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同意楼上的看法。dimer在100bp以下,你的目的条带在750左右,两者距离远者呢。测序要么对,要么在不重要的bp上不符合,这两种结果都是可以接受的。最严重的就是测序错误。建议你搞清楚你所谓的“不理想”的结果是怎么不理想,会不会影响你下一步的实验,比如蛋白表达。如果不影响,就ok啊。如果你实在不待见它,我的想法是减少你的primer的用量。或者参考其他高手的方法吧。
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iii_ii[使用道具]
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降低引物浓度,如果还不行,那就是引物设计的不好。
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zhenxin[使用道具]
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一般调整引物和模板的比例,但也可能和引物设计有关。
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chengjie79[使用道具]
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有就有啊,反正跑胶回收,不影响你实验。测序会有影响吗?应该不会有影响的,不过如果你连接是表达载体,测序的话是有可能有影响,有些公司有些序列他就是测不出。遇到这种情况,先连接t-vector,应该问题可以解决。不过也可能你的序列是复杂的2级结构,确实测不出。那么。。节哀。
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bgf5[使用道具]
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PCR时热启动试试,消除引物二聚体挺好用的
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