小中大12楼
不好意思,我的问题比较多,我是初学者,还很少有机会向高手请教,几乎全靠在园子里浏览大家的精彩讨论,学到很多东西,本次发贴也是实在自己冥思苦想也无果的举措.
我在用文献中查到IFN- gamma的引物找其所扩片段大小时,(上游: 5’-GCTCTGAGACAATGAACGCT-3’ 下游:5’-AAAGAGATAATCTGGCTCTGC-3’)发现结果:
>gi|26354598|dbj|AK089574.1| Mus musculus activated spleen cDNA, RIKEN full-length enriched
library, clone:F830002I10 product:interferon gamma, full insert
sequence
Length=1208
Score = 42.1 bits (21), Expect = 0.019
Identities = 21/21 (100%), Gaps = 0/21 (0%)
Strand=Plus/Plus
Query 1 GCTCTGAGACAATGAACGCTA 21
|||||||||||||||||||||
Sbjct 99 GCTCTGAGACAATGAACGCTA 119
Score = 42.1 bits (21), Expect = 0.019
Identities = 21/21 (100%), Gaps = 0/21 (0%)
Strand=Plus/Minus
Query 21 AAAGAGATAATCTGGCTCTGC 41
|||||||||||||||||||||
Sbjct 327 AAAGAGATAATCTGGCTCTGC 307
即上游引物Query 1 GCTCTGAGACAATGAACGCTA 21
后面比我的引物多出来一个A,我也不知道是原文献中在印刷时少打了一个"A"?还是不要这个"A"也能扩增出想要的目的片段呢?我要想合成引物,要不要把"A"加在后面呢?
不好意思,耽误大家的保贵时间了
