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标题:【求助】LC3、beclin1和p62引物

fei1226com[使用道具]
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发表于 2016-4-9 10:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】LC3、beclin1和p62引物

小弟最近要做自噬。。。。看了点文献，就是没找到LC3的引物，求助各位师兄、师姐，有人用过LC3引物么，希望大家不吝赐教，还有如果有人用过beclin1和p62的引物希望也能告诉小弟下，万分感谢，刚开始做实验啥都不懂。。。。
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yjf1026[使用道具]
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发表于 2016-4-9 10:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
为什么要用LC3、p62的引物？你想通过PCR检测自噬？
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发表于 2016-4-9 10:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
后来换了，我换成LC3和beclin-1了，引物已经设计好了，但是我跑电泳LC3怎么也跑不出来。。。一点进展都没有，beclin 1出的也很浅，但是用15%的分离胶，转膜条件300MA，120v,70min，1抗用的CST的LC3A/B,但是LC3一点都没出，beclin 1出的一般，抗体浓度都是1：500，师求大大，有什么建议么。。。真的好头疼
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发表于 2016-4-9 10:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 yjf1026 于 2016-4-9 10:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
为什么要用LC3、p62的引物？你想通过PCR检测自噬？

后来换了，我换成LC3和beclin-1了，引物已经设计好了，但是我跑电泳LC3怎么也跑不出来。。。一点进展都没有，beclin 1出的也很浅，但是用15%的分离胶，转膜条件300MA，120v,70min，1抗用的CST的LC3A/B,但是LC3一点都没出，beclin 1出的一般，抗体浓度都是1：500，师求大大，有什么建议么。。。真的好头疼
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viviwang1987[使用道具]
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发表于 2016-4-9 10:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一抗不是有好几种类型吗？请问LC3A/B LC3A，LC3B有什么区别吗，做不出来条带或者条带的多少会不会与这几个型号有关系
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发表于 2016-4-9 10:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 viviwang1987 于 2016-4-9 10:25 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

一抗不是有好几种类型吗？请问LC3A/B LC3A，LC3B有什么区别吗，做不出来条带或者条带的多少会不会与这几个型号有关系

这个区别还真不知道，我送出去做能做出来。。。还是我的实验方法的问题
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发表于 2016-4-9 10:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
求lc3的引物，我也在做自噬，非常感谢
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发表于 2016-4-9 10:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
后来换了，我换成LC3和beclin-1了，引物已经设计好了，但是我跑电泳LC3怎么也跑不出来。。。一点进展都没有，beclin 1出的也很浅，但是用15%的分离胶，转膜条件300MA，120v,70min，1抗用的CST的LC3A/B,但是LC3一点都没出，beclin 1出的一般，抗体浓度都是1：500，师求大大，有什么建议么。。。真的好头

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我用的是sigma的LC3B的一抗，1：1000，12%的分离胶，湿传300MA，30或40min，能出来比较明显的两条带
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shenkunjie[使用道具]
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发表于 2016-4-9 10:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
自噬是一个动态的过程，从mRNA水平检测这些分子可能不能代表蛋白的变化及自噬的过程
个人意见，仅供参考
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 小中大
求LC3引物！顺便还想请教LC3A和LC3B的区别
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