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标题:【求助】哪位战友做过表面活性剂液晶的检测

今生如此[使用道具]
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【回复】

说说我的想法。

在油环境下的微生物,可能能利用油作为碳源进行生长。但是在做产表面活性剂微生物的筛选时,油主要不是用来做碳源的,它是作为考察表面活性的对象。此外,是不是能够说利用油生长的微生物都高产表面活性剂,还很难说。

我觉得是不是先说清楚研究目的?是“筛选高产表面活性物质的微生物”还是“筛选可以利用油为碳源的、高产表面活性剂的微生物"。二者的侧重点还是很有不同的。

题外话,国内有从事”油为碳源发酵生产抗生素“的研究,研究的意图还是扩展发酵工业的原料(是炼过之后的残油为原料啊,可不是90的汽油)。

另外,请问用的油平版中除了油之外还有其它的碳源么?
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小熊妮妮[使用道具]
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【回复】

讲一讲我的过程:
我的筛选方法有两套;
1. 把经过富集的培养液(培养基成分是通用的细菌培养基)涂布在平板上(成分与富集培养基相同,只是加了琼脂),把生长良好的单菌落保存,进行以葡萄糖为碳源的发酵生产,定期测定各个发酵液的表面活性(排油圈法),筛选出排油圈最大的那个菌.
2.把经过富集的培养液(培养基成分是通用的细菌培养基)涂布在油平板(我用的是液体石蜡和柴油复合油,再就没有其它碳源了)上,生长了5天后,上面长出了菌落,但是菌落形态不好,都是成片的或是很小,然后再把油平板上的菌落划在普通平板上,两天后就长出了形态单一的菌落.
3.对能过方法1得到的菌和通过2得到的菌进行发酵,碳源使用复合的(液体石蜡.甘油.柴油),发酵过程中对发酵液的表面活性进行动态测定.
4.最后再确定哪一种菌作为下面的研究.

我的研究目的主要还是筛选出能生产生物表面活性剂的菌种,如果它同时有降解油的作用的话,这样更好,呵呵,
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跳跳哈里[使用道具]
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【回复】

继续讨论啊.

你指的细菌培养基是采用无机氮源的还是采用有机氮源的?要是后者,建议不要忽视有机氮源中存在的可被利用的碳源,防止误认为能在油平板上生长的微生物只是利用油为碳源长起来的.

另外,请教一下啊,柴油\石蜡是怎么个灭菌方式?灭完之后在培养基中是什么状态的?没做过,也没看见过,所以请教一下.
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蓝色雨梦[使用道具]
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【回复】

氮源是无机氮源,
富集培养基成分如下:(g/100ml)
葡萄糖 2 ,硫酸铵 0.1 ,硝酸钠 0.2 ,硫酸镁 0.03 ,磷酸二氢钾 1 ,
磷酸氢二钠 0.4 ,酵母膏 0.5
油平板培养基成分如下:(g/100ml)
酵母膏 0.1 ,琼脂 2.0 ,基础盐溶液10ml, PH 7.0
基础盐成分如下:(g/100ml)
氯化钠 0.5 ,硫酸铵 0.025, 硫酸镁结晶 0.025 ,磷酸二氢钾 0.5 ,
磷酸氢二钾 1.0 ,硝酸钠 0.2 ;
油平板的制作过程:(查料中直接在培养基中加了4%的油,我做了预实验,这种方法使制作出的油平板中的油都浮在固体培养基的上面,而且还会流动,影响菌株的方法,以下方法是我摸索出来的,版权所有,呵呵!!)
将上述的油平板培养基灭菌,同时找几张擦镜纸剪成和平板一样大小,在每一个平板中放一张擦镜纸,在纸上一滴滴的滴油,直到把纸全部浸润,千万不能多,然后就像对平板灭菌一样把装有擦镜纸的平板灭菌,倒平板时,先把培养基倒在另外准备的平板里,等平板凝固后,用镊子从刚才灭菌的平板中取出擦镜纸贴在装有固体培养基的平板中,不能有气泡.
需要注意的是:几张擦镜纸千万不要一起用油浸润后,重叠在一起灭菌,灭菌后很难分开,都粘在一起了,这一点我是有教训的,擦镜纸尽量选薄一点的,孔径大一点,这样利于菌株利用下面的营养,即使这样,长出的菌落也不是那种固定形态的,经过5-7天的培养还要划到平板上来分离单菌落.
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yuanyuan[使用道具]
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【回复】

就是说,那张滤纸是一只贴在培养基上面的。

我知道的,但是没试过的:油还是加在培养基中一起灭菌,倒平板,然后用灭菌的滤纸吸附平板表面的油。

课题是提高采油率方面的吧?:)建议找南开大学刘如林老师、浙江大学一位博士丁立孝的论文、华东理工杨世忠的论文看看(可能你都查到了)。
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xiaoxiaojinglin[使用道具]
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【回复】

是的,
滤纸一直是贴在培养基上的,菌株就长在滤纸上面,
你说的方法还有个问题,油加在培养基中灭菌,然后倒平板,倒的时候第一个平板的油的含量特别多,而越到后来越少,油在各个平板的分布不均匀,
我的课题是对生物表面活性剂的研究,
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【回复】

我重点研究了丁立孝的论文,他做的是脂肽类的,我现在筛选出一株铜绿假单胞杆菌,效果不错,
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efp[使用道具]
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【回复】

呵呵,槐糖脂是我在做一篇翻译时遇到的,我现在筛选出了一株铜绿假单胞杆菌,很在可能做鼠李糖脂,
槐糖脂到目前为止,只能用酵母来生产,
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p1900[使用道具]
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【回复】

我是做环境有机污染物的生物降解的,正准备做生物表面活性剂对微生物降解的促进作用,想购买鼠李糖脂或脂肽的成品,查文献发现中科院上海有机化学研究所有鼠李糖脂,但具体的联系方式或者价格什么的就查不到了,想请问一下这边是否有人知道相关信息,不胜感谢啊!
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danzi[使用道具]
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【回复】

终于看到有人在做生物表面活性剂了得了。我现在在进行提取纯化工作,初步鉴定为脂肽。哪位对你们的产品做过TLC ,不知效果如何?
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