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（2）主细胞库(MCB)
取原始细胞库细胞，通过一定方式进行传代、增殖后均匀混合成一批，定量分装，保存于液氮或-130℃以下。这些细胞必须按其特定的质控要求进行全面检定，应合格。主细胞库用于工作细胞的制备，每个生产企业的主细胞库最多不得超过两个细胞代次。
——生物制品生产和检定用动物细胞基质制备及检定规程
horizon801你好，
刚才看了《一般指导原则 》其中提到（……基质制备及检定规程），里面这句话不是很理解的。能帮忙解释一下吗？
谢谢！
楼上战友的问题多么的“似曾相识”啊！呵呵，工作中也曾和同事讨论过这个问题。谈下个人看法：
1、主细胞库为什么会出现两个细胞代次？
一般情况下，重组细胞株构建及建库的过程中。原始细胞株通常要保存十余只冻存管。主细胞库通常保存数十只冻存管。工作细胞库会保存数百只冻存管。根据经验，每只冻存管中细胞总数约1.5-2×10E7cell。
如果，细胞传代到某一代次，所有的细胞总数不能满足冻存需要（1.5-2×10E7cell/只 ×主细胞库冻存管数）。则可能合并两个代次的细胞，构建主细胞库。
但是，根据工作经验，这种情况出现的几率太小了。因为上一代的细胞，都用作传代。即便是有用来“保种”的细胞，它也不能称之为上一代细胞。
除非，同时复苏了两只冻存管，一支传到N代次，一支传到N+1次。为满足主细胞库冻存细胞总数需要。合并两个代次的细胞。
2、主细胞库为什么不能超过两个代次？
目前用作宿主的动物细胞都具有“永生性”，如杂交瘤，CHO。但是，为保证重组细胞的遗传稳定性，无论种子细胞（主细胞库、工作细胞库）都有一个明确的代次限定。并且，要经过“遗传稳定性”试验证明，在上述代次范围内，细胞株的诸多表型（如蛋白质量，蛋白表达水平等）基本稳定，趋于一致。
目前已业内主流的悬浮细胞培养工艺，从一个冻存管，到发酵终点（20，000L反应器）细胞可能要扩增60-90代。为了保证终端产品的质量稳定性，最简单的办法就是，从细胞株源头保证种子细胞的一致性。所以，监管部门确定，主细胞库的细胞来源，最多不超过两个代次。
其实，业内都是普遍自觉的，使用一个代次的种子细胞构建主细胞库。
