小中大【求助】荧光光谱分析及仪器操作中遇到的问题
在做化合物小分子与蛋白质的相互作用的研究，有以下问题请教高手：
1、我做了三个温度下，化合物对该蛋白质的荧光淬灭作用分析，荧光强度F0/F与化合物浓度的线性都挺好，但是计算的结果发现三个温度下的结合常数的线性非常差，只有一个9，主要是中间那个温度的结合常数值偏离很厉害，我想请问，是不是结合常数一定与温度呈线性关系？不呈线性说明一个什么机理？
2、做同步荧光光谱时，随后则药物浓度的增加，△λ=15nm的酪氨酸的在290nm处荧光峰逐渐减弱，同时在313nm处出现新的峰，并且随浓度增加而增强，这说明了什么呢？之前在做荧光淬灭时，只记录发射光谱图时并未出现新的峰，只是荧光强度随药物浓度的增加而下降。
3、在做三维图谱时，激发和发射波长起止，设置只能设成一样的，比如我设的都是是200-500nm, Em=350，Ex=282nm, Exslit=10nm, Em slit=4nm, scan speed=700, number of scans=20, Emission increment=10nm,但扫出来的三维图的坐标却不是我设置的数值，在调图软件中的设置做了波长范围的更改还是这样，可以看到我的三维图的峰像被斧劈了样的，剩了半拉了。这又是什么原因呢？
说明一下，我们买的是PE公司的仪器，实话说，这家公司的售后技术支持水平太差劲了，打电话问了几个工程师，都不知道三维荧光图怎么做，荧光偏振就更没做过了，可是我们买的仪器都带这些功能的，连他们自己都说是标配。
所以，真诚请教丁香园里的高人给予解答，本人不胜感激！
