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标题:【求助】求助血液相容性实验方法

xiaoxiaojinglin[使用道具]
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【求助】求助血液相容性实验方法

我的样品是固体膜,不知道有没有具体测血液相容性的方法?比如溶血试验,血小板活化率,补体激活以及血浆凝固试验。有什么具体的实验方法?刚接触这个完全不懂,请各位帮忙。
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大大[使用道具]
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【回复】

用PBS缓冲溶液浸泡XX膜2h,将浸泡过的膜在37℃的富血小板血浆(PRP)中浸泡2h后,用PBS缓冲溶液漂洗多次,除去没有黏附的血小板,再浸泡入戊二醛溶液 (2.5%) 中,固定30min后,用PBS缓冲溶液漂洗多次,然后依次在不同浓度(50、60、70、80、90、95、100 %)的乙醇溶液中各浸泡30min,逐级脱水。凉干后喷金,用扫描电镜观察材料表面粘附血小板的情况。:victory:
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886爱[使用道具]
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【回复】

还有这个膜的量要多少?
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p1900[使用道具]
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【回复】

溶血实验:首先的话要根据你膜的厚度来确定浸提液体积:膜厚度<0.5mm  6cm2/ml
                   膜厚度>0.5mm  3cm2/ml
注意(膜是双面算面积)
然后在37度用生理盐水或PBS浸泡24h,制为浸提液,以浸提液和阳性、阴性对照(阳性对照为超纯水,阴性对照为生理盐水)各5m+0.1ml的稀释红细胞,在37度孵育1h,l然后3500rpm,5min离心,取上清用分光光度计测试吸光度,波长545nm,空白为超纯水。
计算公式 HR=(A-B)/(C-B)*100%
A=样品,B=阴性对照,C=阳性对照
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美人鱼[使用道具]
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【回复】

不好意思,出现乱码了。
参见GBT 16886.4-2003 与血液相互作用试验选择
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