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标题:[未解决]谁测过谷氨酰胺酶(PG酶)的酶活?

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hey_bye[使用道具]
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谁测过谷氨酰胺酶(PG酶)的酶活?

测过谷氨酰胺酶(PG酶)的酶活?我查了一下,底物溶液需要二肽Cbz-Gln-Gly;请问Cbz-Gln-Gly与Z-Gln-Gly是同一个试剂吗?有没有哪位虫友知道具体该怎样测PG酶的酶活呢?底物又是在哪里买到的?
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青青子衿[使用道具]
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我测过,但是不知道要用你提到的试剂。
不行就换个方法吧,我当时用的就挺简单的。
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兜兜[使用道具]
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可否给提供具体的测定步骤呢,我也是找了好久,找到一篇是用二肽Cbz-Gln-Gly作为底物溶液,但是又查到那个底物是用来测定TG酶酶活性的,所以现在不确定那个方法对不对了
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mr.henry[使用道具]
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多聚半乳糖醛酸酶( PG)活性:Amnuaysin等(2012)和Figueroa等(2010)的方法。取2g样品,用6mL酶提取液( 6%NaCl,内含0.6%EDTA,1%PVP) 匀浆 然后再10000r/min离心20min,上清液即为粗酶提取液,待用。将酶提取液稀释10倍,取稀释液0.1 mL,加0.5%的果胶溶液( pH 4.0) 1.0 mL,对照为pH 4.0的醋酸缓冲液,37℃恒温反应30min后加入0.9 mL DNS试剂,沸水浴5 min,冷却,加水定容至15 mL,摇匀,540 nm波长处测吸光值 以D-( +) 半乳糖醛酸标准溶液作标准曲线,以每分钟每克鲜样37℃时分解果胶产生1 g的游离半乳糖醛酸为1个酶活力单位( U)。
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娜爷~[使用道具]
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咱们两个说的好像不是一个酶,我要测定的是蛋白质谷氨酰胺酶(简称PG酶)的酶活性
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小书虫[使用道具]
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谷氨酰胺酶活力检测,是谷氨酰胺变成谷氨酸的那个吗?
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outeer[使用道具]
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请问您测过吗?可知道具体测定蛋白质谷氨酰胺酶酶活性的方法呢?
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冰@舟[使用道具]
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测过,我测的是微生物里面的。其实最精确的方法就是测谷氨酸的生成量。
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XXXX111[使用道具]
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我也查了一些文献,都是从微生物里面提取纯化之后测定谷氨酰胺酶酶活性,但是他们用的那个底物二肽Cbz-Gln-Gly是测定谷氨酰胺转氨酶酶活性的底物,所以我现在不确定那个方法是否是测定谷氨酰胺酶酶活性的方法了。请问您也是先从微生物里面提取谷氨酰胺酶,又测的酶活性吗?能具体告知您是怎么测的吗?我是食品方向的,就是直接买的PG酶成品,然后用于小麦蛋白中,但是实验需要测定PG酶的酶活性,求指点
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差不多先生[使用道具]
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所以买标品一定要去正规的地方买
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