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标题:【求助】帮我解答一下荧光测试时倍频峰是怎么产生的

QQ爱[使用道具]
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【回复】

谢谢你的指教,你说的半频峰所指就是激发波长的整数倍喽?另外你知道倍频峰是怎么产生的吗,谢谢!
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兔子[使用道具]
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【回复】

如果你说的是激发谱中的倍频峰,
那正好是发射谱产生半频峰的逆过程.
这些都是光栅本身引起的系统峰.
之所以在发射光谱中不会见到倍频峰, 是因为
我们总是从大于激发波长的位置开始记录的.
同样, 在激发光谱中不会见到半频峰, 是因为
我们总是只记录到小于发射波长的位置.
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妮子@[使用道具]
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【回复】

)(1)选择滤光片,应该从自己的样品入手,了解的越多,选择起来就更有针对性。(2)滤波片由长通滤波片,短通(低通)滤波片,带通滤波片。因为荧光的波长比激发光长,所以用长通滤波片,使荧光透过,激发光不透过避免干扰
(3)滤光片是塑料或玻璃片再加入特种染料做成的,红色滤光片只能让红光通过,如此类推。玻璃片的折射率原本与空气差不多,所有色光都可以通过,所以是透明的,但是染了染料后,分子结构变化,折射率也发生变化,对某些色光的通过就有变化了。比如一束白光通过蓝色滤光片,射出的是一束蓝光,而绿光、红光极少,大多数被滤光片吸收了。
滤光片的作用很大。广泛用于摄影界。一些摄影大师拍摄的风景画,为什么主景总是那么突出,是怎样做到的?这就用到了滤光片。比如你想用想起拍一朵黄花,背景是蓝天、绿叶,如果按照平常拍,就不能突出“黄花”这个主题,因为黄花的形象不够突出。但是,如果在镜头前放一个黄色滤光片,阻挡一部分绿叶发出的绿光、蓝天发出的蓝光,而让黄花发出的黄光大量通过,这样,黄花就显得十分明显了,突出了“黄花”这个主题。
(4)有时候溶剂的影响还是蛮大的。如果出现的倍频峰超出你要的波长范围内,你直接就截取那段的波长段,也是不影响的。
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daomei[使用道具]
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【回复】

你是说,激发光谱和发射光谱中的倍频峰都是光栅本身引起的吗?
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qinqinai[使用道具]
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【回复】

比如我最近做了几个荧光测试,我用540nm的激发波长,在820nm左右有荧光峰,但是,我用三种不同的材料用同样的激发波长,其荧光发射波长基本相同,那是什么原因呢?
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hcy517[使用道具]
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【回复】

是的, 就是这个意思.
你可以用一个空白样(比如说DI H2O)验证一下.
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PP熊[使用道具]
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【回复】

这个有点儿像1.5 lambda的峰, 我以前在测薄膜荧光时遇到过(看下面示意图).
当激发光和发射过在样品的同一面时(左边上下两图), 就会出现1.5 lambda的峰; 而当激发光和发射过在样品的不同面时(右边上下两图)则没有. 估计可能是发射的激发光(左有进入监测器, 右则没有)和发射光发生干涉之类的作用所导致.
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malong[使用道具]
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【回复】

谢谢你的讲解,现在明白了很多,估计也正如你所说的一样,不然不可能三种不同的材料用同样的激发波长时其发射波长会一样。因为我所测的是固体,就放在一个圆形的样品池中,其光路图应该就是在同侧的,如果说测液体的话应该是在异侧的
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yayayu[使用道具]
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【回复】

那是用滤光片可以滤掉1.5倍频吗?
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钻石[使用道具]
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【回复】

还是想问一下,不光是rayleigh散射的倍频峰,还有拉曼峰,一般出现在激发波长之后,想去除,测试激发约为250nm,滤光片应该用哪种呢?
另外测试激发谱时,在短波长一侧,因为氙灯最短波长只到220,在220后20-30附近会出现一个弯折,不知道是什么原因造成的
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