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标题:【求助】10nm以上的纳米金

青青草[使用道具]
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【求助】10nm以上的纳米金

10nm以上的纳米金上能否直接连上蛋白?谢谢了,我每次做都聚集了,用什么办法可以阻止聚集呢?谢谢大家了
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xiaoxiaojinglin[使用道具]
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【回复】

能够直接连接到蛋白上
但是要注意两个关键问题:
1 纳米金溶液的ph值必须要等于或者略高于蛋白质的等电点
2 蛋白质的浓度要稍高于所需的蛋白量 不足的蛋白量要用BSA补充
纳米金与蛋白的这种连接依靠的是静电吸附 以上两个条件直接影响吸附效果
只要两个条件满足 纳米金是不会发生聚合的 即使向里面加较高浓度的氯化钠
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p1900[使用道具]
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【回复】

应该是先将金颗粒修饰一下吧
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efp[使用道具]
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【回复】

楼主可以查查文献 好像清华的有位教授做的不错 感觉和你的比较类似
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mimima[使用道具]
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【回复】

我觉得静电吸附是一种,其他方式还有很多,比如edc偶联得方式等等,找个综述看一下就明白了
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xiaoxiaoai[使用道具]
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【回复】

胶体金是一种常用的标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。
  1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学,此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法,在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatogra-phy)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay DIGFA),用于检测 HBsAg、HCG 和抗双链DNA抗体等,具有简单、快速、准确和无污染等优点。
    免疫胶体金技术的基本原理
  氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。
  免疫金标记技术(Immunogold labelling techique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中,这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大,称之为免疫金银染色。
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rrra6[使用道具]
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【回复】

蛋白上的巯基能否连在纳米金上啊?
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wawa11[使用道具]
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【回复】

应该能,S一般都用来稳定Au
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