原子荧光 » 讨论区 » 分析百问 » 【转载】:【讨论】同一样品不同仪器测试结果相差20nm?

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:[未解决]【转载】:【讨论】同一样品不同仪器测试结果相差20nm?

  [未解决]本主题悬赏 可用分 1  
happydream[使用道具]
二星
Rank: 7Rank: 7Rank: 7


UID 72176
精华 2
积分 13076
帖子 20067
信誉分 102
可用分 28092
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-5
状态 离线
1
 

【转载】:【讨论】同一样品不同仪器测试结果相差20nm?

同一样品在不同仪器上测试其发射光谱,相同激发光,发射光谱相差20nm,怎么回事
顶部
iop[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 119925
精华 1
积分 4038
帖子 7492
信誉分 102
可用分 12243
专家分 0
阅读权限 255
注册 2014-2-3
状态 离线
2
 
这个差别也太大了吧
顶部
jiankufanhan[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 71374
精华 3
积分 4177
帖子 7621
信誉分 106
可用分 12412
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-24
状态 离线
3
 
肯定是一个仪器有问题,建议拿标样看看是哪个出了问题。
顶部
nmn[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 119926
精华 2
积分 4087
帖子 7526
信誉分 104
可用分 12354
专家分 0
阅读权限 255
注册 2014-2-3
状态 离线
4
 
仪器肯定有问题,建议调试下,最好是用一种仪器检测
顶部
shuishui[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 119322
精华 2
积分 4179
帖子 7650
信誉分 104
可用分 12516
专家分 0
阅读权限 255
注册 2014-1-8
状态 离线
5
 
这个是有可能的,即使是同一厂家的两台仪器,一台经过响应校正,一台没有,得到的结果是没有可比性的。主要是激发光在不同波长下能量不一致,PMT对不同波长的响应不一致,光路中光栅及各反光镜对不同波长的反射率不一致,造成仪器不同波长的响应不一致。只有在经过响应校正后得到的数据才是样品的真实数据,这个数据才可以与其他型号厂家的仪器结果比较,但前提是其他仪器也经过相同的校正
顶部
teddy[使用道具]
二星
Rank: 7Rank: 7Rank: 7


UID 72177
精华 4
积分 12607
帖子 19262
信誉分 106
可用分 27960
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-5
状态 离线
6
 
谢谢大家的回复,但还有个问题,另外一种样品在这两个仪器上测试,出了分辨率不同外,主峰都相近。
顶部
vbnm[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 119927
精华 2
积分 4008
帖子 7368
信誉分 104
可用分 12070
专家分 0
阅读权限 255
注册 2014-2-3
状态 离线
7
 
仪器出问题了吧
顶部
艰苦奋斗[使用道具]
二星
Rank: 7Rank: 7Rank: 7


UID 71375
精华 5
积分 10524
帖子 16352
信誉分 106
可用分 24337
专家分 1
阅读权限 255
注册 2011-8-24
状态 离线
8
 
如果在红光区,差别会很大有可能,紫外可见区差别应该小一些。



建议:

1、两台仪器是否能确认波长准确性?

2、是否都有了校正文件?

3、请排除其他的干扰峰。
顶部
风往尘香[使用道具]
二星
Rank: 7Rank: 7Rank: 7


UID 71377
精华 2
积分 6046
帖子 10106
信誉分 103
可用分 17361
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-24
状态 离线
9
 
你的样品是什么? 是不是有光变化呢?
顶部
jiushi[使用道具]
一星
Rank: 6Rank: 6


UID 119272
精华 0
积分 4139
帖子 7578
信誉分 100
可用分 11864
专家分 0
阅读权限 255
注册 2014-1-7
状态 离线
10
 
发射光谱相差20nm是指2台仪器的发射峰扫描有 20nm位移吗?

你可以先排除样品的变化,在两台仪器上多次反复扫描样品,看扫描图谱是否一致,如有条件也可再配一次样品看看。



在确定样品没有问题后,再讨论仪器是否正常,有个比较简单的测试方法,我们可以作水的拉曼散射实验,激发波长调至365nm扫描,在发射波长414nm可以得到拉曼散射,如果2台仪器的结果都在414nm附近,可以认为波长基本没大问题。否则可能要仪器工厂检修了。

你的这个实验,对于未做过仪器能量归一化的荧光分光光度计,确实可能有一定波长位移 ,尤其是对于发射光谱宽的样品。

荧光发射光谱一般都很宽,有几十甚至上百纳米,如果你的样品扫描峰很宽,峰值位置不很明显(比如在荧光峰附近30-50nm范围,荧光值都差不多大)。不同仪器能量不一致就显得很突出。

在红光区影响更大的原因是,荧光分光光度计的光电检测器采用光电倍增管(PMT)为多,光电倍僧管在红外的衰减非常大,器件在此区域的一致性较差。所以,在红光区(一般在650以后)仪器若不做归一化,一致性确实会比较差。其实,对于分光光度计,在波长的两端,一致性都是会差点的
顶部