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这个问题实际就是峰纯度检测的问题,我来把前面战友的观点综合一下,综合的不对的还请大家指点:
1、多种不同原理的方法比较是首选。
2、其次采用DAD检测器进行光谱分析,如果提示不纯,估计有问题。纯度阈值受仪器、流动相等影响,所以只能作为参考。对于分子结构中差异有紫外吸收官能团的,dad检测器一般还是可以准确判断峰纯度的,但对于结构中无紫外吸收的那些差异,DAD检测器就无能为力了,比如某肽链中的氨基酸差异、或者一些对应异构体,dad也是无能为力的。
2、如果DAD不行,那么就需要采用质谱鉴别了,优选液质联用,如果是含盐流动相,可以采用收集不同时段的色谱流出物的方式,脱盐,进行质谱检测。
3、如果怀疑有异构体,这个就比较头疼了,非对应异构体需要二级(主要是对CID的能量有要求,可以打断侧链)的质谱才能判断侧链的区别。对应异构体的辨别目前好像只有waters的离子淌度质谱(没做过)有一定的分辨能力,但也不是万能的。
所以峰纯度判定需要结合化合物及可能杂质的结构特点,来合理选择。