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标题:[求助]如何确定某个色谱峰为单一峰?

damingxia0904[使用道具]
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做个液质应该可以解决问题,根据质谱给出的分子离子峰或碎片峰等信息可以判断该保留时间所对应的是否为单体化合物。
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不请自来[使用道具]
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如果有二极管阵列检测器,可通过光谱图与对照品峰比较来鉴别峰的纯度。
可以在色谱峰的多作几个点来检测
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yueban-1147[使用道具]
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真要证明的话最好还是将其分离出来,制备少量进行验证。
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hulu呼噜[使用道具]
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打质谱鉴定!
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8964357[使用道具]
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我觉得靠紫外DAD检测器,改变流动相极性,加样这些方法也不能完全证明一个色谱峰就是单一的化合物,在实际中,如果我们结合几种方法验证后也只能说明它是单一成分的可能性很大。
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张先生[使用道具]
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是用不同保留现象的柱子来检查, 比如凝胶+反相,交换+反相,如果还是一个峰,应该能确定
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lc-ms
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xue258[使用道具]
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觉得用DAD检测器应该能确定吧~!~
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ROSE李[使用道具]
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DAD检测的峰纯度并不可靠,还是应该做LC-MS确认
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木槿[使用道具]
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这个问题实际就是峰纯度检测的问题,我来把前面战友的观点综合一下,综合的不对的还请大家指点:
1、多种不同原理的方法比较是首选。
2、其次采用DAD检测器进行光谱分析,如果提示不纯,估计有问题。纯度阈值受仪器、流动相等影响,所以只能作为参考。对于分子结构中差异有紫外吸收官能团的,dad检测器一般还是可以准确判断峰纯度的,但对于结构中无紫外吸收的那些差异,DAD检测器就无能为力了,比如某肽链中的氨基酸差异、或者一些对应异构体,dad也是无能为力的。
2、如果DAD不行,那么就需要采用质谱鉴别了,优选液质联用,如果是含盐流动相,可以采用收集不同时段的色谱流出物的方式,脱盐,进行质谱检测。
3、如果怀疑有异构体,这个就比较头疼了,非对应异构体需要二级(主要是对CID的能量有要求,可以打断侧链)的质谱才能判断侧链的区别。对应异构体的辨别目前好像只有waters的离子淌度质谱(没做过)有一定的分辨能力,但也不是万能的。
所以峰纯度判定需要结合化合物及可能杂质的结构特点,来合理选择。
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