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标题:[未解决]样品极性有点大,反相柱会不会好分点?

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ccssqq[使用道具]
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样品极性有点大,反相柱会不会好分点?

我分的样品极性有点大,TLC展开 用氯仿甲醇水 7:3:0.5 硫酸乙醇显色  D101大孔树脂50 75 95洗下来的点传了个图上来,用正相硅胶回收率70%左右,我想问用反相柱会不会好分点??
我看很多人说极性大的东西用ODS分比较好,但是ODS貌似也有好多种吧?有人用过吗,真心请教,我不知道选哪种好啊,我分的样品里估计黄酮类,酚类的东西比较多把,做了2个多月了,还是没点进展啊,老板要求分单体来着。。。。。

希望大家多给点意见吧!!

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小莲[使用道具]
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回复 #1 ccssqq 的帖子

用反相柱可以分,看上图用正相也可以。正相柱对极性化合物有较好的区分性,反相柱对非极性化合物有较好的区分性,你的样品属于中等极性。
ODS柱的本质都一样,只是做成商品时质量有差别。
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huhuiowen[使用道具]
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你的极性不大,可以利用ODS和硅胶反复,如果含黄酮类化合物可以用凝胶,ODS的分类一般按粒径来分的,色谱柱一般是5微米,普通柱层析一般用50微米,不然太细流速太慢
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就用ODS 50微米的反相硅胶就可以,需要跑加压柱,否则流速太慢,
且分离效果差,高压等于高效嘛。
估计你样品里含有酚羟基较多,所以会有大量样品吸附在正相硅胶上,
最好先过一遍正相在上反相,可以试试加入甲酸或乙酸,我加甲酸一般不会超过0.5%。正相硅胶最好别用含水试剂,否则就变成分配柱层析了,上样量减小。
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ccssqq[使用道具]
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回复4楼,你是说ODS分离效果也不好么
甲酸我试过了,不如加水的效果好。。

厂家给我一份ods柱材的材料,有YMC的,还有GH GEL的,还有一堆孔径啊,粒径啊的,一般怎么选好呢?

我这两天单独把黄色斑点(用正丁醇萃取得到)上了下液相,等度,用的sb-c18的柱子,感觉分离效果也不好,一加大进样量,峰就变了,要不就开叉了要不就合了。。
这时不时说明sb-c18不好分我的样品啊
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ccssqq[使用道具]
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回复 #3 huhuiowen 的帖子

我的样品中含有黄酮类的。。
请问这样ODS选用哪种型号的比较好呢?

我这两天单独把黄色斑点(用正丁醇萃取得到)上了下液相,等度,用的sb-c18的柱子,感觉分离效果也不好,一加大进样量,峰就变了,要不就开叉了要不就合了。。
这时不时说明sb-c18不好分我的样品啊
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yinshengxu[使用道具]
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一般柱层析ODS都是50微米的,
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282850063[使用道具]
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我用的是YMC的,别的型号我真不是太清楚,YMC感觉不错。
也不一定说sb-c18就一定不好。估计还是样品太杂,如果你觉得过
正相好,就先跑根小柱子试试,液相观察样品是不是死吸附了,如果
只是死吸附5%-10%就没什么关系。
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