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标题:[讨论帖]大家谈谈使用离子对试剂的经验

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我们在做六类的某一项目用到戊烷磺酸钠,流动相要求的pH为2.10,结果由于仪器问题,pH没达到要求。峰前延很严重,拖尾因子只有0.85。后来对仪器重新校正,峰行就变得很好了。开始的时候用的国产的戊烷磺酸钠,拖尾且不理想,改用日本进口的,无论分离度还是拖尾,都非常不错。

不知道这样说,楼主明白没?呵呵

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因为对仪器重新校正,还是改用进口试剂,还是别的原因,最终使得峰型、分离度变好,这是个问题!

国产试剂和进口试剂的差别对拖尾及分离度改善不大,影响更多的可能是保留时间及死体积、未知峰的增加等。

如有参考文献或直接数据,更有说服力,以上观点仅是个人据经验判断,仅供参考。
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因为对仪器重新校正,还是改用进口试剂,还是别的原因,最终使得峰型、分离度变好,这是个问题!

国产试剂和进口试剂的差别对拖尾及分离度改善不大,影响更多的可能是保留时间及死体积、未知峰的增加等。

如有参考文献或直接数据,更有说服力,以上观点仅是个人据经验判断,仅供参考。

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工作时间尚短,请前辈见谅与包涵。同等试验条件下做,持续时间为两个周左右,因此才出结论。
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通过两天来的调查与了解,得知加入离子对试剂的流动相的pH值非常的重要,会影响选择性!我们实验室检测同一种物质,相同条件下,不同的人配置的流动相的pH先后相差0.3~0.8,这样不同pH的流动相检样品主峰,有的分叉有的不分叉,但由于流动相pH值不同造成的多峰现象我还是不太了解原因?

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上面的情况,我咨询了一位老师,说是“由于pH的不同,可能会造成样品在流入色谱柱后与流动相相容性的改变,造成先后流出,而出现的双峰现象?”

这个事情不知是否有不同的见解呢?
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因为对仪器重新校正,还是改用进口试剂,还是别的原因,最终使得峰型、分离度变好,这是个问题!

国产试剂和进口试剂的差别对拖尾及分离度改善不大,影响更多的可能是保留时间及死体积、未知峰的增加等。

如有参考文献或直接数据,更有说服力,以上观点仅是个人据经验判断,仅供参考。

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您好!老师,首先肯定的是您一定具有非常严谨的科学态度,这个问题我也想到过,我想您一定想表达的就是这个意思(仪器重新校正),我是理解的:)

另外,关于国产试剂与进口试剂的差别,据这两天我在不同论坛上发帖,大概得知:国产与进口的差异大,国产的基线噪音大(不代表共性)。

关于分离度的事宜,我倒是也比较感兴趣!
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我们在做六类的某一项目用到戊烷磺酸钠,流动相要求的pH为2.10,结果由于仪器问题,pH没达到要求。峰前延很严重,拖尾因子只有0.85。后来对仪器重新校正,峰行就变得很好了。开始的时候用的国产的戊烷磺酸钠,拖尾且不理想,改用日本进口的,无论分离度还是拖尾,都非常不错。

不知道这样说,楼主明白没?呵呵

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您好!老师。很高兴,我提出的话题与您的回复能够得到大家如此热情的相应,我在这里向你们表示非常的感谢!

既然大家都如此的关心这个话题,不防请老师再讲讲看呢?其实,我想荣誉版主的意思“能否再详细说明一下,即实验有效性方面”,那么在如上引号前提下,我来向您及其他的专家提2个问题:

1、离子对试剂的优劣是否影响分离度呢?能否就使用进口与国产前后实验对比,出现的色谱峰(主峰与杂质峰)分离情况做一下详细的说明?

2、另外,峰型的改善的确与含离子对试剂的流动相的pH有关,这与我们曾经做出的现象是一致的,而且pH对峰型的影响很重要,差零点几都差异很大,原因我现在还不好说?是样品不稳定发生反应,还是流动相pH值的变化,导致样品与流动相互溶性的变化,而出现的样品先后流出色谱柱造成的峰变形甚至是多峰?


注:某一项目,有意的变化流动相比例(缓冲盐与有机相为90:10)为91:9,则主峰后面多出一个杂质峰;流动相比例改为92:8,则主峰完全分列成两个大小接近的峰。
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您好!老师。很高兴,我提出的话题与您的回复能够得到大家如此热情的相应,我在这里向你们表示非常的感谢!

既然大家都如此的关心这个话题,不防请老师再讲讲看呢?其实,我想荣誉版主的意思“能否再详细说明一下,即实验有效性方面”,那么在如上引号前提下,我来向您及其他的专家提2个问题:

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1、离子对试剂的优劣是否影响分离度呢?能否就使用进口与国产前后实验对比,出现的色谱峰(主峰与杂质峰)分离情况做一下详细的说明?--刚订购了一瓶进口离子对试剂(Hercules),到货周期为4-6周,届时有对比结果后发上来与大家讨论。
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2、另外,峰型的改善的确与含离子对试剂的流动相的pH有关,这与我们曾经做出的现象是一致的,而且pH对峰型的影响很重要,差零点几都差异很大,原因我现在还不好说?是样品不稳定发生反应,还是流动相pH值的变化,导致样品与流动相互溶性的变化,而出现的样品先后流出色谱柱造成的峰变形甚至是多峰?--pH值的不同,影响色谱峰的峰型是很有可能的,但如果pH值“差零点几都差异很大”,只能说明该色谱条件非常之苛刻,耐用性不好,甚至该色谱系统与药物会发生某种反应都是有可能的,这就需要更多的信息来判断了。
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注:某一项目,有意的变化流动相比例(缓冲盐与有机相为90:10)为91:9,则主峰后面多出一个杂质峰;流动相比例改为92:8,则主峰完全分列成两个大小接近的峰。--观点同“2”:流动相比例的不同,影响色谱峰的峰型、个数是很有可能的,但如果比例90:10和91:9则峰型峰个数都不同,只能说明该色谱条件非常之苛刻,耐用性不好,甚至该色谱系统与药物会发生某种反应都是有可能的,需要进一步优化完善条件,这就需要更多的信息来判断了。
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离子对试剂老是出一些鬼峰。
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tuuu2[使用道具]
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今日进行了Merck庚烷磺酸钠与天津禹王及天津科密欧离子对试剂的UV截止波长测试,发现相同浓度西安,MERCK的要吸收低,而天津禹王的则吸收强度大,天津科密欧的不但吸收强度大,且有2个吸收峰。

但不知为什么merck的氨水UV吸收超大的,在201nm,明日对比下国产的分析纯,拭目以待吧?

是氨水有核外电子跃迁在UV下,还是试剂不纯造成的,还未知,待查,有清楚的老师吗?
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