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标题:[求助]高温破坏实验温度超过熔点可以吗？

ROSE李[使用道具]
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发表于 2011-11-25 15:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
呵呵经验有限，那你是怎么做物料平衡的？如果不用有关物质浓度来做，那么怎么选择浓度呢？依据是什么，另外，破坏实验的目的是验证专属性，什么的专属性？

我是针对他的问题猜测浓度可能低，我可没说有关物质一定用什么浓度
至于有关物质使用什么浓度是通过实验来确定并经过验证的

=============================================================================================================

物料平衡也可以做啊，比如用高浓度（当然是特定浓度，而不是随便取点样品破坏，浓度选择没有具体规定）破坏后，调节pH值至中性然后稀释至有关物质测定浓度进样（如果流动相缓冲能力强，浓溶液体积又小，也可不调pH值直接流动相稀释，具体问题具体分析），这个过程任意一步的理论浓度都是已知的，为什么不能计算物料平衡呢。

破坏试验就是方法专属性的一部分啊，溶剂、辅料是否干扰测定属于专属性，破坏出的杂质是否干扰主峰和其他待测物也属于专属性。
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发表于 2011-11-25 15:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
破坏实验是用有关物质测定的浓度进行这一点不敢苟同，破坏试验的目的是验证专属性，即保证主峰与相关物质的分离，只要能达到目的，用哪个浓度破坏都可以，楼主说的高温破坏超熔点当然也可以，只是最后进样稀释至有关物质浓度即可。另外每个化合物的紫外吸收强弱不一致，这位战友用0.5mg进10μl响应未必低，部分吸收很强的化合物用此浓度反而高也说不定。

这位战友说的很对，我用的是该品种口服制剂的2010药典的含量测定浓度，0.5mg进20μl，主峰吸收比较高了。但是我们领导的意思是加大样品浓度，让大多数杂质都体现出来、昨天试了试5mg、10mg、15mg，但是按锋面积归一化法看纯度，主峰和主峰后第一杂质峰百分比没有变，重结晶后5mg、10mg、15mg/ml是99.68%和0.15%.样品还能溶解，不知道最大浓度定多少呢。现在15mg/ml确实又多出来4个峰，百分比占0.01%，没有杂质对照品，不知道如何做响应因子考察？
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发表于 2011-11-25 15:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
（1）连续一百小时，也可以采用大锅，然后不停加水的方式
就是弄一大盆水放在高处，通过毛巾一点一点流到水浴锅中

（2）试试样品溶液后再做破坏

这是网上朋友献出的我觉得比较好的方法，大家看看
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发表于 2011-11-25 15:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

物料平衡也可以做啊，比如用高浓度（当然是特定浓度，而不是随便取点样品破坏，浓度选择没有具体规定）破坏后，调节pH值至中性然后稀释至有关物质测定浓度进样（如果流动相缓冲能力强，浓溶液体积又小，也可不调pH值直接流动相稀释，具体问题具体分析），这个过程任意一步的理论浓度都是已知的，为什么不能计算物料平衡呢。

破坏试验就是方法专属性的一部分啊，溶剂、辅料是否干扰测定属于专属性，破坏出的杂质是否干扰主峰和其他待测物也属于专属性。

应该是这样的。谢谢
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发表于 2011-11-25 15:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #14 米西11米西 的帖子

何必要稀释到有关物质浓度呢，这还不如有关物质浓度下进行破坏来的更加直接省事，同时也可以进行物料平衡计算了，当然使用更高浓度也未尝不可，或许更好，因为有的杂质看不到，如果高浓度下破坏再稀释进样，或许就没有意义

另外我也没有说你现在做的东西一定要用什么浓度，我只是说可能低了

做实验关键要靠自己，如果自己认为对，做下去吧
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米西11米西[使用道具]
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发表于 2011-11-25 15:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你们讲得都有道理，你说的浓度低，我们领导也这样说，因为没有有关物质测定方法，所以没有有关物质的浓度，现在是要建立方法，选色谱条件，考察分离度，所以做破坏实验。有另一口服制剂的有关物质方法，浓度是1mg/ml。通过试验，15mg/ml又多出了4个峰的情况，0.5mg/ml应该是浓度低杂质小于检出限了，z最后具体浓度定多少，可能还得看实验的情况，看杂质的情况了。现在是想先让杂质都检测出来（希望是都能够都体现出来），看色谱条件是否能分离开这些存在的杂质，然后再决定如何控制这些杂质。希望大家还是多提意见和建议，本人第一次做，一切都在摸索中，非常感谢！
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发表于 2011-11-25 15:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #16 米西11米西 的帖子

不就对了吗，最后相当于在有关物质浓度下进行破坏实验了

而且浓度并不是越高越好，举个极端的例子，100mg/ml,应该说杂质会更多，但这样是不是有意义？

那就问题来了，那么我们应该怎么制定有关物质浓度？以什么样的标准判断此浓度就是有关物质的浓度？
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发表于 2011-11-25 15:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个说来话长，而且质量研究的重点就是有关物质

我想问的是，你们做的是1类新药？没有标准可参考？
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ROSE李[使用道具]
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发表于 2011-11-25 15:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用高浓度是个人习惯，所谓具体问题具体分析，我们最近做的几个API的流动相缓冲能力都很强，所以我习惯用高浓度小体积破坏，再用流动相直接稀释到测定浓度，利用流动相的缓冲能力可省掉调节pH值一步，而用有关物质浓度破坏，调节完pH值浓度可能都变化了，反倒不好操作。另外，这东西是我自己设计的，仅供参考。

一类药方法的建立不是简单的事情，逐步摸索，有关物质测定浓度以杂质都被有效检出为准，没有具体规定；我们的项目70%以上为1类药，没有参考标准，过程也很艰苦，有类似经历的战友欢迎互相讨论、交流。
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bananapeople[使用道具]
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发表于 2011-11-25 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #19 ROSE李 的帖子

是吗，挺牛的嘛
贵单位有多少项目呢？您主要是做什么的，有什么经验可以分享来着？

有关物质的研究工作是一个非常艰苦的工作
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