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标题:[分享]细胞污染图片专区

园丁##[使用道具]
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霉菌污染确实很烦,我去年暑假里做诱导,每次做到plating的时候就开始霉菌污染,前期的操作一点问题都没有,把信心打击的!这次做PC12细胞,也出现了这样的问题,酒精擦手,不说话,uv等都做过,还是不能完全避免,感觉好像不污染就象中头彩一样,ft。。。

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原来我们这里也有霉菌感染的,不过后面在培养基里加上了0.5%的大福康(原来的双抗各改为0.25%的青霉素和链霉素),效果还可以!你可以试试!!!
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birdfish[使用道具]
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我培养的肾小管上皮细胞(HK-2),购买的细胞株。用的是DH/F12,培养前将培养基37度水浴过,培养一天,可以见上清有许多像螺旋体样的丝状物,好像从细胞分泌的,不动,但是随着培养越来越多。还有好多的黑色渣子,传代后还有,但是细胞生长的速度还可以。3天就张满T25的培养瓶。请教是什么原因,如何避免呢?
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阿敏[使用道具]
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re:各位的环境就是好,我的培养箱水盘几乎一个星期擦一次(因为不只一个人作实验),有的时候还能看到霉菌长出来,真是担心我的半箱细胞,如果要污染,我只有跳楼了!呵呵,各位对这个有什么办法没?

1:不锈钢水槽倒入100%酒精,点燃。别摸哟,很热的。
2:然后用塑料槽放点(250ml)5%硫酸铜溶液。效果还行吧
我原来也有同样的问题,水槽下面有一层黄色的霉菌。

要是再不行 就要大干了

把无菌间的东东全停了 然后 用10%福尔马林(甲醛原液也行)熏蒸,熏蒸时把你的培养箱 和柜子的门打开里面的东西都拿出来。此前要搞卫生哟。这一熏,你一个星期也别想进去干活了。
然后就是前面说的两步了。
当然水槽里可以加一点防腐剂嘛(这个我没加过听别人说的)。
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阿敏[使用道具]
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re:我的MCF7/ADR变成这样了,双抗增至7%也无效,一半细胞脱壁、死亡,不知道是什么原因,请大侠们帮忙。(20*20倍)

像是真菌污染,不知道是否游动,可以加两性霉素B 或制霉菌素 10倍剂量冲击用药,不要过早换液 等到液体变黄 再说。一般5天以后就会见效,同时可加入硫酸庆大(抗支原体)10倍剂量联合用药。
如果没有抗真菌药可以购买人用的氟康唑 (片剂,非常贵3片10元)按血药浓度5ug/ml为1倍浓度计算配成100倍到10倍的治疗液,加入10%血清然后过滤除菌。一般可以起到抑制效果,但是不如两性霉素和制霉菌素效果好。
救急还是可以用的。

对了再问问是不是污染物在细胞两极附着,随着时间的延长,细胞多数发生脱壁并且发生崩解。
你可以把培养物作增菌试验,然后定性。同时可作药敏试验。
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看这个,支原体污染


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传说中的黑焦虫,长得暴快。24小时就满视野都是了。用PBS洗洗,细胞竟然还活着。下面是20倍镜下得视野。


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各位大侠看看这个是什么污染阿?
细胞好像不受这种东西的影响。换液后贴壁良好。


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给培养的水盘里加0.02%的叠氮钠可以有效的预防真菌污染,尤其是夏天气温高的时候。
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sunnyB[使用道具]
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我的细胞是否污染支原体?
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阿敏[使用道具]
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我有同感,最重要的是无菌操作。有一次同时给两瓶细胞换液,一瓶长出真菌,一瓶安然无恙。超净台我是用前后都要用酒精消毒,感觉最深刻的一点是:进入超净台时袖口要紧,必须用酒精擦手。其他的只要不犯原则性的错误就没什么了。
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