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标题:[分享]细胞污染图片专区

园丁##[使用道具]
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你那是典型的真菌污染!具体什么菌种我有一下子查不到,但应该是属于深部真菌的有一种.如果细胞 不是特别珍贵,就弃去不用了.如果还要继续培养,可先用PBS洗4-5遍,然后按每毫升培养液加100微升的比例加入"大扶康"(临床常用,我们用病人用剩的,瓶底残留的那几毫升就足够了,不用另外购买),培养过夜,然后换成50微升/每毫升继续培养24小时,一般都行.
另外,那种真菌一般在呼吸道比较多.你们操作时戴口罩,穿隔离服吗?口罩一定要戴的哦.作为预防,可以在每毫升培养液中加20微升大扶康,不会影响细胞生长.不过我不知道你样的是什么细胞.能预防最好不加.
要注意污染物处理,别形成二次污染哦.
祝你顺利.
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BOSS2011[使用道具]
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好像是HepG2,我也碰到过的,很是头t疼.就是不知什么原因,传代会出现.而且一加G418细胞就消融了,好像蚕食似的,原因不明!
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duoduo[使用道具]
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应该是血清污染了,我也碰到,换了血清后就没事了!
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duoduo[使用道具]
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近日细胞频遭不测,请教各位大虾是什么污染?见图:培养液中可见一类黑色小虫,生长迅速,镜下快速运动,单个不成串。
图2:(*40, Olympus DP50)

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应该是血清污染了,我也碰到,换了血清后就没事了!
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盼盼[使用道具]
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我们用鸡胚制备成纤维细胞,结果还有像Jeffrey88 一样的虫虫,其他的材料都没问题,用别的实验室的鸡胚就没有污染。可能是支原体。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精氨酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii),为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,尤其是游动支原体(M.mobile),来源于水体污染。国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。 尤其是游动支原体来源于水体污染,喜欢在玻璃上游动,如果细胞密度大,它不动,因为没有玻璃空间,但一旦细胞密度小,则会自由扭转、游动,400倍光镜下看得很清楚。有这方面的问题可以请教:日本的Miyata博士,我在日本跟他见过一面。
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yonger[使用道具]
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看到楼上第二张图片右下角的明亮圆圈了么?我的细胞里经常会有,应该是酵母菌污染,不知道对不对
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tianmei001[使用道具]
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看到上面很多战友细胞都被霉菌污染了,而很多是由于培养箱污染的原故,我想说的是其实这种污染是很容易避免的,我养细胞近一年了,养过很多种细胞,还从来没发生过类似的情况,培养箱的水如上面有位战友所讲,加叠氮钠使其浓度到千分之零点二的(有剧毒,配置是小心勿沾到皮肤上)就可以防腐了,我们在第一使用培养箱或万一被污染的情况下通常的做法是在常规的用千分之一新洁尔灭和75%的酒精搽拭培养箱后,加入消毒过的水(普通的双蒸水高压即可,叠氮钠可先配成1%贮存浓度,用不着消毒因为微生物是不能成活的),在往培养箱中加水前放细胞室开紫外灯照20-30分钟,此时每500毫升的水加1毫升的贮存浓度叠氮钠,混匀,到入培养箱中即可。
上面的过程我想很多人是这么做的,应该没问题,至少你首次不会带入污染,我想提醒的是在每次从培养箱中取出细胞到显微镜下观察前,一定要打开细胞室的紫外灯照20-30分钟(手伸进培养箱前当然要用酒精棉球搽拭,不过一般都能做到),观察完将细胞放入培养箱前用酒精棉球搽拭细胞培养瓶后再放入。我经常看到有些人是一去细胞室先从培养箱中取出细胞观察,再做决定,如果需要处理则再开始打开细胞室的紫外等消毒。这样做是省事但极易带入细菌、霉菌等造成污染,因为你衣服上(哪怕你穿细胞室的工作服但没照过)以及细胞间的环境中就有细菌、霉菌等微生物,当打开培养时空气一流通这些微生物就有可能进入,而培养箱内的环境又极适合微生物的生长。所以我说宁可麻烦一点,但也值得!实验只要不因失误重做哪怕准备时间长一点做起来都算快的。
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蒲公英[使用道具]
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我们的方法是在水盘里加入微量的叠氮化钠,不知道大家有没有试过?从来也没发现过霉菌污染的现象.真不敢想象培养箱里出霉菌了该怎么办?
另外加水好象主要是为了保湿吧,我们还在里边放了些带盖的盘子,主要目的也是为了防止培养基快速蒸发

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请问:叠氮钠是怎么用法?有没有具体标准?多谢!
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@STAR@[使用道具]
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支原体污染在光镜下也能看到吗?具体形态是啥样的?有人说支原体污染没有可见表现。希望不吝赐教,先谢了.
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小螺号[使用道具]
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我的MCF7/ADR变成这样了,双抗增至7%也无效,一半细胞脱壁、死亡,不知道是什么原因,请大侠们帮忙。(20*20倍)
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