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标题:[分享]Caco-2细胞培养的一点重要经验

笑弯了腰[使用道具]
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发表于 2011-12-1 16:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

文献中说TEER大于200-500不就可以用了吗？我现在的TEER在500多，用苯酚红考察通透性小于
1*10-6，不就证明可以用作转运实验了吗？请问，您那2000多是怎么回事？
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fqswdzd[使用道具]
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发表于 2011-12-1 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问在做药物转运实验时所用的PBS是什么成份呢？文献中多数选用HBSS，但是都没说明是否含钙，镁,而且，钙离子对细胞的紧密连接是有影响的，那么大家做实验时是用的哪种HBSS呢？请指教！
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发表于 2011-12-1 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

caco-2做转运时间一般用的TRANSWELL的规格是多少的啊
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发表于 2011-12-1 16:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这细胞好养，但无法去除空泡，随着细胞融合，空泡会明显增多，请老师发个图片给大家吧。

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空泡是经常出现，一旦出现空泡的时候基本上细胞已经差不多不行了。我这里没有拍很清晰的图片，实验室没有专门照相的转换装置。待买中呵呵。
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月牙牙[使用道具]
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发表于 2011-12-1 16:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问在接种millicell插入式细胞培养皿有什么操作要点要注意的吗？感觉这一步和后面细胞能否分化良好很相关。谢谢！
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HP007[使用道具]
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发表于 2011-12-1 16:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问在接种millicell插入式细胞培养皿有什么操作要点要注意的吗？感觉这一步和后面细胞能否分化良好很相关。谢谢！

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这个我觉得就是接种均匀就好。另外就是接种前细胞尽量吹散成单个单个。。。
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tianmei001[使用道具]
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发表于 2011-12-1 16:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
11月6日开始养了，可惜亚运戒严不能进去单位的实验室，只好放了3天没去测电阻，10号扣去空白暂时有70到80的测定值。
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windy+++[使用道具]
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发表于 2011-12-1 16:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你好！我最近开始养Caco-2细胞，遇到了一些问题，相向高手咨询下，我目前养的是上个学姐冻存留下的，她养的时候状态就不好，我现在养的细胞在同一个瓶子里状态也不一样，有的部分就有大大小小的圆空泡，泡周围长的乱乱的，不规则，这是营养不良还是什么原因导致的？ 有的部分就长的还可以，铺路石的样子，而且细胞落层长，瓶底有时还未铺到80%-90%，直接用肉眼就能看到瓶底白白的一片，我想知道，这个时候是不是就长过了，应该提早消化吧？对了，细胞里会有很多黑色的小点点~~~~是正常的分泌物吗？
我要做吸收透过模型，将细胞接种到Millicell膜上，接了3个浓度的，测电阻观察，可用电阻仪测出来的电阻特别没谱，同一孔的电阻重复测量时就呈升高趋势~~而且低中高三个浓度的电阻趋势有时会倒过来，不太正常呀！
期待回复！多谢呀！
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四福晋[使用道具]
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发表于 2011-12-1 16:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #28 windy+++ 的帖子

这个细胞长的就是那样，空泡装有可能是你消化没有消化好。
我不做电阻的。这个我也不清楚啊。
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windy+++[使用道具]
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发表于 2011-12-1 16:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

哦，谢谢！感觉Caco-2很容易从瓶底吹下来，若吹成单细胞的话，需要的时间较长，你有同感吗？
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