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标题:[分享]Caco-2细胞培养的一点重要经验

四福晋[使用道具]
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回复 #30 windy+++ 的帖子

很有同感,不过成单个不在吹,在于消化,一定要用好的胰酶消化,消化前PBS洗细胞。
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了了[使用道具]
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有人用Caco2接种病毒的吗
病毒感染Caco2后出现大量的空泡算是CPE吗
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abc816[使用道具]
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请问用CACO-2做转运试验最多可以用到多少代的细胞做SEEDING呢?谢谢
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ffooll[使用道具]
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我有几个问题想请教一下:
1.测电阻时,用Hank’s洗完的电阻值是不是比培养基养的时候测的电阻小?为什么?
2.细胞养到21d以后,要测电阻值时是用不含钙镁的Hank's吗?含有钙镁会对细胞有什么影响?
3.这个细胞接种到transwell里面以后,如果每隔一天测下电阻的话,是不是特别容易污染?我如果用聚碳酸酯膜,看不到细胞形态,那怎么判断我的细胞污染没污染呢?污染后细胞电阻长不上去去吗?
4.做完实验后,版主还会测下电阻吗?会不会降很多呢?
期待回复,谢谢!呵呵~~
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中国特色[使用道具]
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谢谢楼主的好经验分享,我们正好也在培养Caco-2细胞,具体是建立一个模拟肠壁渗透的模型,在体外对药物的吸收做一个大致的评估(In vitro permeability study).
关于Caco-2的培养基,我来补充点儿实在的:
-DMEM with 10%FBS, 10mM HEPES, 1% Non-essential amino acids and 2mM L-glutamine.
*DMEM Medium(powder):
GIBCO,Cat No.:12100-046
*HEPES(powder):
SIGMA,Cat No.:H-4034
*Non-essential amino acids:
GIBCO,Cat No.:1140-050
希望对准备养Caco-2的战友有帮助,而且耐心真的很重要.

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我最近也要开始养Caco-2细胞,从上海细胞库买的细胞,问他们培养基的时候都回答得含糊不清,从说明书中看到买的细胞培养基都是粉末状的,是这样么?希望高手指点迷津啊,不然细胞刚到手就要毁了
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二丫头466[使用道具]
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我最近也要开始养Caco-2细胞,从上海细胞库买的细胞,问他们培养基的时候都回答得含糊不清,从说明书中看到买的细胞培养基都是粉末状的,是这样么?希望高手指点迷津啊,不然细胞刚到手就要毁了。。。。。先谢了
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yychen[使用道具]
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细胞长的好慢呀
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yychen[使用道具]
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细胞长的好慢呀
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园丁##[使用道具]
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Caco-2细胞,最大的特点:

1、挑培养基,一定要有胎牛血清的DMEM才成,不然死给你看。

2、消化要完全,胰酶量要给足,时间要充分,同时要多吹打,尽量散成单细胞。
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tieshazhang[使用道具]
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同感,有哪位大虾用CaCo-2做过hoechst啊,发张照片上来观摩下,不胜感激。。。。。。正用这种细胞做毕业论文,忒痛苦的。
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