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标题:[讨论贴]单细胞凝胶电泳技术及应用讨论

一叶[使用道具]
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回复 #30 dotaaa 的帖子

您好,看来您的情况比较特殊,不过,别气馁,我会尽我的最大努力帮助你,你看了不少文献说明你关于SCGE的知识储备应该不错。我搞的是放射医学毒理,我当时做的课题是 γ 射线对小鼠、人外周血淋巴细胞DNA损伤的观察,并拟合人淋巴细胞照射后的剂量效应曲线,后来有总医院的两个硕士生来我们这SCGE,是他们硕士课题的一部分,做的是低剂量辐射对放、化疗效果的影响。虽然我没有做过有关药物毒理方面的研究,但是我们的研究方向还是有相通之处的,可以互相借鉴,而且如果你能来的话,我也可以帮您找我们这里搞药理的老师帮忙,虽说我们这里的条件也不是很好,但做SCGE还是绰绰有余的,呵呵。还要看您的导师能否同意您出来做试验,如果您能来,我会尽量帮你在这边联系的。
祝您成功
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乌贼老弟[使用道具]
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最近一直在做试验,想请教一下 一叶 老师和 园丁## 老师,我安装CASP的时候,先是全部下载之后但是安装上的程序,总是显示不成功,很是奇怪,想问一下大家到底怎样才能装上这个程序。3Q
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乌贼老弟[使用道具]
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对了,我的一张片子的结果觉得有点奇怪,为什么尾部的DNA会和头部连在一起啊,不象文献上的那种很是规则的拖尾,我的结果也不是每个剂量都是这个样子,大部分还是挺好的。


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2011-12-2 10:40
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一叶[使用道具]
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回复 #33 乌贼老弟 的帖子

战友您好:
先说您的CASP软件,干脆我放到我的网络U盘,晚上您去下载吧。
图像的问题你可以去看看我做的彗星图像,仅供参考。我不认为你的彗星图像不好,我觉得完全可以出现这样的彗星,不过有一点,您的EB浓度没有掌握好,背景太乱了。太多多余EB结晶和杂质。这种图片质量发文章很困难。

cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=2729243&sty=1&tpg=1&age=0')
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utt0989[使用道具]
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我用的农药是溴虫腈,市场上卖的是质量浓度为10%的悬浮剂(微米或厘米级)。我们实验室一位博士合成了质量浓度为5%的纳米级(20-30nm)溴虫腈悬浮剂(粒径变小的话可以提高药效),而且他制备了TiO2修饰纳米级溴虫腈的功能化制剂。(利用氧化钛的光降解作用加快溴虫腈农药的降解,从而达到低残留的目的)。
我实验的目的就是评价他制备合成的两种农药的毒性(毒理研究)。
所以受试物是:
纳米溴虫腈,
经TiO2修饰的纳米溴虫腈
TiO2
市场上售的溴虫腈。
我做微核的话要用小鼠先做一下急性毒性试验,求出LD50。
做SCGE,是取了小鼠淋巴细胞培养后喂毒,当然如果体内喂毒的话也可以,看哪个方便效果好为主。
麻烦老师替我想想了。

感激不尽啊!!!
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乌贼老弟[使用道具]
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唉,别提了,我们实验室没有条件照相,这几个片子是我放了好多天后才去照的,所以胶已经很干了效果当然不是很好。不过最有收获的还是看见您提到的EB的浓度问题,我用的是1ug/ml的浓度,每次用40ul,染色2分钟,用水冲掉,这是同学帮我照的嘛,背景是她调的,当时我们觉得不好,但是同学说可以用photoshop处理,所以就这样了,老师啊,是不是不能处理啊?哪÷那是不是就不能用了
还有您用过cometscore软件吗?怎么它要求的格式是bmp啊,我得文件根本就打不开。
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一叶[使用道具]
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首先,荧光染色的东西最好马上看,否则影响结果。
其次,您的染色液量我觉得多了点,我用2ug/ml,1ml注射器1滴就可以。
第三,要忠于实验结果,图象内容不能更改,可以用ACDSEE或PHOTOSHOP转换图象格式或大小,所以,作出来的实验图象质量要好。
您说的cometscore软件我没有用过,不过JPG格式可以用上面的两个软件转换成BMP格式。
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utt0989[使用道具]
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一叶老师,我导师说我花2万块太贵了,微核就自己实验室做。
我把受试物改为3个,
纳米溴虫腈
TiO2修饰的溴虫腈
TiO2
设3个剂量组4.9mg/Kg, 9.8mg/Kg,19.6mg/Kg,(参照人家做市售溴虫腈DNA损伤的剂量)
每个剂量组4只老鼠(杂交鼠即可,雌雄对半)
阴性对照组4只,总共老鼠40只。
腹腔染毒24h后采血。
这样工作量就少了很多,估计很短的时间就能做完吧?
您帮我算一下器材费,试剂费,老鼠费,人员费,还有两个人的住宿费,来回车费等等大概需要多少钱,我得再向我导师审批。
真是不好意思啊,麻烦您了,谢谢!
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一叶[使用道具]
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回复 #36 乌贼老弟 的帖子

注意了,请您到我的网络U盘下载CASP软件,左键点击那个CASP,弹出对话框,然后点击“直接下载”就OK了,双击安装,没问题的,我已经试验过了。下面附上这个软件的使用说明。

cuturl('http://lq6688.vdisk.cn')
这是网络U盘的链接,直接点击即可。
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一叶[使用道具]
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这是CASP的工作界面,我选的是我做的3Gy照射的彗星图像,分析后的界面。


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2011-12-2 10:46
36151209.snap.jpg (36.72 KB)
 
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