小中大回复 #1 hexiaomei 的帖子
Chirobiotic T柱,以大环糖肽作为手性填料,反相模式下分离。
“1、chirobiotic T柱子的pH是3.8-6.8,可是用完0.1%TEAA(pH4.1)缓冲液用什么冲柱子呀?
我用的是10/90的甲醇/水,那这个流动相的PH值是7左右吧,会不会对柱子不好?”
用完0.1%TEAA(pH4.1)缓冲液,可以先用同样比例的但不含buffer的流动相冲洗色谱柱,然后换成高比例的水将buffer洗净,最后换成100%甲醇封柱,保存。
“10/90的甲醇/水,那这个流动相的PH值是7左右吧,会不会对柱子不好?”
可以用的,T柱100%洗都可以,但分析好样品后记得洗柱,然后100%甲醇封柱,保存。
可以参考Operating Instructions for CHIROBIOTIC™ LC Stationary Phases中的柱再生方法。
“Regeneration
Columns showing decreased resolution can sometimes be regenerated by passing several column volumes of 50/50: ACN/50 mM NH4OAc followed by pure HPLC water and then acetonitrile or methanol through the column at 0.5 mL/min. Acetonitrile or methanol may be used for final displacement and storage. Long term storage (>24 hours) is best done in isopropanol or methanol.“
2、含水高的流动相能用于chirobiotic T柱吗?
可以!但分析好样品后记得将柱内溶剂替换为100%甲醇。
由于手性柱价格贵(与普通的C18柱比),所以用之前,建议尽量仔细将说明书看明白,免得成为“柱杀手”,O(∩_∩)O~
ps:一些参考资料
Operating Instructions for CHIROBIOTIC™ LC Stationary Phases
cuturl('http://www.sigmaaldrich.com/etc/medialib/docs/Supelco/Product_Information_Sheet/w706017.Par.0001.File.tmp/w706017.pdf')
Chirobiotic Handbook-A Guide to Using Macrocyclic Glycopeptide Bonded Phases for Chiral LC Separations
cuturl('http://www.sigmaaldrich.com/etc/medialib/docs/Sigma/General_Information/chirobiotic_handbook.Par.0001.File.tmp/chirobiotic_handbook.pdf')