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标题:[未解决]ELISA方法进行抗体检测求助

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发表于 2018-3-19 09:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

ELISA方法进行抗体检测求助

各位技术达人，在用ELISA方法进行抗体检测的时候经常会遇到这样一个问题，就是显色后空白对照的数值会特别高！一开始我以为是某个溶液染菌，所以都是当天配制当天进行ELIS检测。但是在这种情况下还是会出现本底高的情况。我包被用到的是重组抗原，封闭用的BSA，一抗都是兔血清多抗，二抗是羊抗兔二抗。在此请各位大侠指导。
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发表于 2018-3-27 15:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

建议

首先不知道你针对重组抗原的效价怎么样，效价是不是本身也很高呢？
做ELISA出现本底高的情况，可能是包被抗原过量，不知道你的包被量，另外洗涤也会很大程度影响空白对照的数值，洗涤充不充分，是否快速多次洗涤呢。
建议：包被量一般在100ng就足够了，快速多次洗涤，每次洗板子不要太长时间；封闭的话用BSA也可以的，但是建议换成5%的脱脂牛奶，可能会改善，祝实验顺利
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Kiwi2021[使用道具]
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发表于 2022-6-17 13:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
建议：包被量一般在100ng就足够了，快速多次洗涤，每次洗板子不要太长时间；封闭的话用BSA也可以的，但是建议换成5%的脱脂牛奶，可能会改善，祝实验顺利
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