浅析蛋白分离纯化的一般原则

蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛,是一项重要的操作技术,也是目前的研究热点之一,目前我国也有不少医药研发外包服务公司提供了蛋白分离服务。美迪西生物医药是一家临床前医药研发外包服务公司,可以承接从mgkg级的化合物纯化分离服务。蛋白质的分离和提纯工作是一项艰巨而繁重的任务,其分离纯化应遵循以下原则:

1、总体原则

1)纯化前对样品的来源,目的蛋白的理化性质及生物活性要做充分了解。

2)纯化前明确纯化所要达到的目的。

3)根据所要达到的目的在回收率,纯度,成本等之间合理取舍次要指标,把主要指标放在第一位。

2、纯化过程

    纯化每一步都充分利用目标蛋白和杂质成分理化性质差异。

3、纯化方法的选择,如下表所示

        

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层析方法

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亲和层析

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凝胶过滤层析

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离子交换层析

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疏水层析

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分离机制

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特异性亲和

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大小

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电荷

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疏水性

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选择性

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非常高

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中等

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     中等

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载量

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纯化速度

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中等

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中等     

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生物相容性

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非常好

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中等     

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目标蛋白的得率

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中等     

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捕获浓缩阶段

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中间纯化阶段

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精制纯化阶段

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++

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4、不同阶段突出重点