小中大浅析蛋白分离纯化的一般原则蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛,是一项重要的操作技术,也是目前的研究热点之一,目前我国也有不少医药研发外包服务公司提供了蛋白分离服务。美迪西生物医药是一家临床前医药研发外包服务公司,可以承接从mg到kg级的化合物纯化分离服务。蛋白质的分离和提纯工作是一项艰巨而繁重的任务,其分离纯化应遵循以下原则: 1、总体原则 (1)纯化前对样品的来源,目的蛋白的理化性质及生物活性要做充分了解。 (2)纯化前明确纯化所要达到的目的。 (3)根据所要达到的目的在回收率,纯度,成本等之间合理取舍次要指标,把主要指标放在第一位。 2、纯化过程 纯化每一步都充分利用目标蛋白和杂质成分理化性质差异。 3、纯化方法的选择,如下表所示 parsetable('', '', '[tr][td=1,1,114] 层析方法 [/td][td=1,1,114] 亲和层析 [/td][td=1,1,114] 凝胶过滤层析 [/td][td=1,1,114] 离子交换层析 [/td][td=1,1,114] 疏水层析 [/td][/tr][tr][td=1,1,114] 分离机制 [/td][td=1,1,114] 特异性亲和 [/td][td=1,1,114] 大小 [/td][td=1,1,114] 电荷 [/td][td=1,1,114] 疏水性 [/td][/tr][tr][td=1,1,114] 选择性 [/td][td=1,1,114] 非常高 [/td][td=1,1,114] 中等 [/td][td=1,1,114] 高 [/td][td=1,1,114] 高 中等 [/td][/tr][tr][td=1,1,114] 载量 [/td][td=1,1,114] 高 [/td][td=1,1,114] 低 [/td][td=1,1,114] 高 [/td][td=1,1,114] 高 [/td][/tr][tr][td=1,1,114] 纯化速度 [/td][td=1,1,114] 中等 [/td][td=1,1,114] 中等 低 [/td][td=1,1,114] 高 [/td][td=1,1,114] 高 [/td][/tr][tr][td=1,1,114] 生物相容性 [/td][td=1,1,114] 好 [/td][td=1,1,114] 非常好 [/td][td=1,1,114] 好 [/td][td=1,1,114] 中等 好 [/td][/tr][tr][td=1,1,114] 目标蛋白的得率 [/td][td=1,1,114] 高 [/td][td=1,1,114] 高 [/td][td=1,1,114] 高 [/td][td=1,1,114] 中等 高 [/td][/tr][tr][td=1,1,114] 捕获浓缩阶段 [/td][td=1,1,114] +++ [/td][td=1,1,114] + [/td][td=1,1,114] +++ [/td][td=1,1,114] +++ [/td][/tr][tr][td=1,1,114] 中间纯化阶段 [/td][td=1,1,114] +++ [/td][td=1,1,114] + [/td][td=1,1,114] +++ [/td][td=1,1,114] +++ [/td][/tr][tr][td=1,1,114] 精制纯化阶段 [/td][td=1,1,114] ++ [/td][td=1,1,114] +++ [/td][td=1,1,114] +++ [/td][td=1,1,114] + [/td][/tr]') 4、不同阶段突出重点。
|