中药提取物淫羊藿黄酮类化合物活性筛选和药理作用

淫羊藿总黄酮和淫羊藿苷是中药淫羊藿的提取物,具有广泛的药理作用,有着极大的研究价值和开发潜力。建立氧化应激模型进行淫羊藿黄酮类化合物活性筛选究,可以为其药理作用研究提供了研究基础。建立体外血脑屏障模型,并利用该模型对淫羊藿中活性成分进行筛选,为中枢神经系统药物的快速高通量筛选提供实验依据。

我国有研究者从化学成分和细胞生物学层面分析了中药淫羊藿黄酮类化合物中的活性成分,分别建立了体外氧化应激模型和血脑屏障模型,利用模型进行淫羊藿黄酮类化合物活性筛选,并对筛选出的活性成分进行分析、鉴定和体外抗氧化研究,为与心血管疾病和中枢神经系统疾病相关的药物筛选提供了新的研究思路。美迪西是一家临床前CRO公司,集化合物合成、化合物活性筛选、结构生物学、药效学评价、药代学评价和毒理学评价为一体的符合国际标准的综合技术服务平台,提供新药研发外包服务

1、体外氧化应激模型在淫羊藿黄酮类化合物活性筛选上的应用

氧化应激是指细胞暴露于高浓度氧分子或氧的化学衍生物而引起的细胞损伤。建立成功可靠的氧化应激模型,对于揭示氧化应激机制以及研究抗氧化应激药物的作用机制有着重要意义。

研究者利用并应用体外氧化应激模型从淫羊藿黄酮类化合物中筛选活性成分以进行化合物活性筛选,建立了从中药中筛选与心血管疾病相关的活性化合物的体外氧化应激模型。该方法是利用中药中活性成分与氧化损伤人脐静脉内皮细胞上的效应靶点特异性结合的特性,使中药提取物与内皮细胞相互作用,活性成分与之结合,未结合的成分被洗掉。再通过细胞膜受体失活的方式,使与细胞受体特异性结合的成分解离下来,应用液相-质谱联用技术分析鉴定筛选出的活性成分。将该模型应用于淫羊藿黄酮类化合物中,筛选与心血管疾病相关的活性成分。

研究结果表明,淫羊藿黄酮类化合物中至少有6种活性成分能与人脐静脉内皮细胞受体特异性结合,其中3种活性成分被鉴定分别为朝藿定B、淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ。

2、体外血脑屏障药物筛选模型筛选活性成分研究

应用体外血脑屏障药物筛选模型从淫羊藿黄酮类化合物中筛选活性成分。中枢神经系统对外界相对封闭,具有免受多种物质影响的独特结构,致使许多药物不能进入中枢神经系统发挥作用,利用体外血脑屏障模型可筛选出能够作用于中枢神经系统的活性物质。研究者利用ECV304/C6细胞共培养模式来模拟在体血脑屏障建立药物筛选模型,通过跨膜电阻和小分子物质渗透率分析证明,ECV304细胞在C6细胞诱导下所建模型具有体内血脑屏障的特点。应用所建血脑屏障模型,从淫羊藿黄酮类化合物中筛选出能够通过血脑屏障的活性成分,并进-步利用液相-质谱联用技术对筛选出来的药物进行分析和鉴定。

研究结果表明,淫羊藿黄酮类化合物中至少有2种化合物能够通过血脑屏障,它们分别是淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ。淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的体外抗氧化研究淫羊藿苷是淫羊藿中主要的活性成分,属于黄酮类化合物,药理研究表明,淫羊藿苷具有保护心血管系统、调节免疫、抗肿瘤和影响内分泌等多种重要的生物活性。

3、淫羊藿黄酮类化合物药理作用

(1)抗氧化

实验结果表明,淫羊藿苷具有很强的清除DPPH? O2-?、还原能力和总抗氧化的能力,有较强的清除OH·的能力,且均呈剂量依赖性。淫羊藿次苷Ⅱ对DPPH的清除能力很强,在清除OH·02-·和抑制脂质过氧化方面也有较强的作用。淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ抗氧化效果在一定范围内与其浓度呈正相关,即随着浓度的升高,抗氧化能力逐渐增强。但当抑制率或清除率达到一定水平时,剂量的加大对其抗氧化效果影响不大。淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ对同一种自由基的清除能力也不相同。究其原因可能是因为两者酚羟基数目、所处位置和糖基的数目、所处位置的不同。

(2)对心脑血管具有保护作用

动物实验表明,淫羊藿苷能降低心肌氧耗。同时使心室射血前期明显缩短,在心室内压下降的条件下,左心室射血期不变而等长收缩期缩短,反映总外周阻力降低,心脏后负荷减轻,对合并有高血压的冠心病患者更有利。以0.5mgkg-1给家兔颈总动脉注射,淫羊藿苷可较快地增加脑血流量达60以上,提示淫羊藿苷增加脑血流量可能是直接扩张血管的结果。

(3)增强免疫作用

淫羊藿苷可减少抑制性T细胞(Ts)产生,使Ts受体鼠抗体水平明显升高,增强体液免疫。给小鼠皮下注射淫羊藿苷,发现胸腺产生IL223H2TdR的掺入能力增强,且对ConA的刺激反应增强,认为淫羊藿苷对胸腺免疫有激活作用,能增强T细胞功能。

(4)抗肿瘤作用

一系列的研究表明,淫羊藿苷具有诱导肿瘤细胞分化、抑制肿瘤细胞增殖和抗肿瘤细胞转移等作用。