在单克隆抗体药物研发流程中，肿瘤靶点发现和选择之后，接下来是要进行抗原制备阶段了。抗原的制备在单克隆抗体药物研发流程中属于至关重要的一个环节，抗原制备得不好，有可能得不到抗体，没有实验结果。一个良好的抗原分子量要足够大、外源性强、可降解性好且结构要尽量复杂。
单克隆抗体技术又被称为肿瘤“生物导弹”，是能直接导向肿瘤的药物。单抗抗肿瘤药物以其良好的临床效果和极佳的生物靶向性，稳居抗肿瘤药物的前列，该药物研发流程一般包括发现和选择肿瘤靶点、抗原制备、抗体制备、抗肿瘤单克隆抗体功能鉴定等环节。其中抗原制备处于单抗药物研发流程中的关键一环。药品研发是一项非常伟大的工作，对人类健康的影响非常大，所以其流程也是相对较复杂。美迪西生物医药是一家临床前医药研发外包服务公司，提供新药研发外包服务。
1、单抗药物抗原种类
根据特异性的不同，肿瘤抗原可以分为肿瘤特异性抗原和肿瘤相关抗原。
（1）肿瘤特异性抗原
指肿瘤细胞所特有，不存在于正常组织、细胞上的抗原，大多为癌基因或抑癌基因的突变产物。通过MHC-I分子递呈于肿瘤细胞表面，能够被CT8+T特异性识别和结合。TSA目前的重要应用是肿瘤的CAR-T疗法.
（2）肿瘤相关抗原
肿瘤相关性抗原(TAA)指并非肿瘤细胞所特有，也可存在于正常组织、细胞，特别是胚胎组织上的抗原，但在肿瘤细胞上表达明显增高。
根据抗原种类的不同，可分为天然蛋白质抗原、基因重组抗原、合成性抗原和小分子半抗原。
（1）天然蛋白质抗原
由于天然的蛋白存在修饰，而且结构比较复杂（除了线性表位还有结构表位），因此天然的蛋白质是很好的抗原。但是天然的蛋白很难达到较高的纯度，这给免疫和后面的纯化带来了不少麻烦，而且只适合在机体细胞内表达量比较高的蛋白。
（2）基因重组抗原
相对于天然蛋白来说，重组蛋白比较容易获得得较高的纯度，而且鉴定也比较方便，整个生产过程更容易掌握。值得注意的是重组蛋白为了纯化的方便，通常需要带一段标签，在免疫中动物体通常会产生这些标签的抗体，在后面的纯化过程中需要去掉这些标签的抗体。
（3）合成性抗原
合成抗原将氨基酸按一定顺序聚合成大分子多肽，使其具有，亦称合成多肽抗原。因其结构是已知的，故多用于蛋白质构型与抗原特性的关系和抗原抗体反应机理的研究，也可用以制备合成肽疫苗。
（4）小分子半抗原
大多数药物、毒素、环境污染物分子质量小于1000u（≈Da），属于仅有反应原性而无免疫原性的半抗原。如多肽、大多数的多糖、甾族激素、脂肪胺、类脂质、核苷、某些小分子量的药物等。这些小分子本身没有免疫原性，当与载体结合后形成大分子，可以获得免疫原性。
2、单克隆抗体药物抗原制备方法
就抗体制备而言，天然抗原的效果最好，运用反复冻融法、超声破碎法等直接从肿瘤标本中分离抗原；基因重组抗原是指将目的基因插入载体，在原核或真核系统中表达，获得相应抗原；合成性抗原是根据蛋白的氨基酸序列，通过抗原表位分析找到抗原性好的多肽片段，通过固相合成制备抗原；小分子半抗原分子量较小，免疫原性较弱，必须与载体连接之后才能产生免疫应答反应。
制备出的抗原，根据性质可分为颗粒型抗原和可溶性抗原，可溶性抗原要添加佐剂增强免疫原性。颗粒性抗原如各种细胞、细菌、寄生虫等，大多用静脉内注射免疫法，较少加佐剂作皮内注射。蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶、补体、细菌毒素、免疫球蛋白片段、核酸等皆为良好的可溶性抗原，免疫前常需纯化。
3、单克隆抗体药物的作用
（1）作为检验医学实验室的诊断试剂
单克隆抗体以其特异性强、纯度高、均一性好等优点，广泛应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。并且单克隆抗体的应用，很大程度上促进了商品化试剂盒的发展。
（2）蛋白质的提纯
单克隆抗体是亲和层析中重要的配体。将单克隆抗体吸附在一个惰性的固相基质上，并制备成层析柱。当样品流经层析柱时，待分离的抗原可与固相的单克隆抗体发生特异性结合，其余成分不能与之结合。将层析柱充分洗脱后，改变洗脱液的离子强度或pH，欲分离的抗原与抗体解离，收集洗脱液便可得到欲纯化的抗原。
（3）肿瘤的导向治疗和放射免疫显像技术
将针对某一肿瘤抗原的单克隆抗体与化疗药物或放疗物质连接，利用单克隆抗体的导向作用，将药物或放疗物质携带至靶器官，直接杀伤靶细胞，称为肿瘤导向治疗。另外，将放射性标记物与单克隆抗体连接，注入患者体内可进行放射免疫显像，协助肿瘤的诊断。
