肿瘤坏死因子（TNF）是由激活的巨噬细胞、NK细胞及T淋巴细胞产生的一种能够直接杀伤肿瘤细胞的糖蛋白。然而TNF过量表达容易带来败血症休克、爆发性肝炎、类风湿性关节炎和移植后的排斥反应等疾病。TNF的可溶性受体sTNFR1可以中和TNF的毒性，能有效抑制TNF所诱发的细胞毒作用以及治疗肝功能衰竭。重组蛋白表达技术可以获得具有生物学活性的重组蛋白sTNFR1-MBP，为进一步研究该蛋白在肝功能衰竭的作用奠定基础。
1、什么是可溶性受体sTNFR1
TNF受体有TNFR1（55KD）和TNFR2（75KD）2种，均为糖蛋白，其中TNFR1介导了大部分TNF的生物学功能，如抗病毒、诱导凋亡、活化NFkB、成纤维细胞增殖等。TNFR分为膜结合型（mTNFR）和可溶型（sTNFR）2种类型。可溶型受体为膜结合型受体胞外区在TNF转换酶（TAGE）的作用下从细胞膜上解离下来，游离在血液中，仍可与TNF结合，但是无法介导TNF的信号传导。因此sTNFR能够竞争性地与TNF分子结合，形成可溶性TNF-sTNFR复合物，间接抑制TNF的生理作用。尽管sTNFR属于内源性物质，但是从体液中直接提取sTNFR的量有限，难以满足临床治疗与诊断的需要，利用重组蛋白表达技术生产sTNFR为提供足够的sTNFR进行研究具有非常大的作用。
现在重组蛋白技术已经广泛用于生命科学和医学研究等领域。美迪西生物医药提供重组蛋白表达服务，其拥有多种蛋白表达系统，包括原核蛋白表达系统、酵母蛋白表达系统、昆虫细胞蛋白表达系统（杆状病毒）哺乳动物细胞蛋白表达系统，具备多种融合技术，可以为客户在蛋白表达与纯化方面提供多种选择。从方案设计、基因优化、表达条件优化到纯化的技术体系，以提高目的蛋白的表达水平。
人可溶性sTNFR1是一种具有生物学活性的分泌性蛋白，有研究者使用原核表达系统表达了sTNFR1-MBP融合蛋白，为该融合蛋白的生物学活性和临床应用提供了研究基础。
2、sTNFR1蛋白的原核表达研究
研究者构建了人可溶性肿瘤坏死因子受体1基因的原核表达质粒，诱导sTNFR1-MBP融合蛋白表达，观察表达产物的生物学活性。方法是以HeLa细胞的总RNA为模板，用RT-PCR方法扩增sTNFR1全编码区基因片段，构建含有目的片段的T载体克隆及原核表达载体pMAL-c2x重组质粒亚克隆。经异丙基-β-D半乳糖苷酶(IPTG)诱导重组质粒菌表达sTNFR1，以淀粉树脂亲和层析法纯化重组蛋白，并对重组蛋白进行序列分析和Westernblot鉴定。MTT法测定重组蛋白的生物学活性的测定。结果经DNA序列分析和Westernblot鉴定，成功构建了人sTNFR1重组质粒基因工程菌。因此成功获得了具有生物学活性的人sTNFR1-MBP融合蛋白，为进一步研究奠定了基础。
可溶性受体sTNFR1可以有效降低TNF的毒性作用从而治疗肝功能衰竭，通过sTNFR1的原核表达研究，获得具有生物学活性的sTNFR1-MBP融合蛋白，可以为该蛋白的临床应用奠定基础。
