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标题:[讨论帖]“黑胶虫”问题

caihong[使用道具]
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发表于 2011-12-8 15:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

刚买回来的血清中就有这种小黑点，37度培养血清，黑点明显增多，国产进口都有，只是数量上有差别。我在用的方法是过滤培养基，传代时离心，有明显改善，但是尚未根除
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乌贼老弟[使用道具]
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发表于 2011-12-8 15:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
其实黑胶虫是有药可以杀灭和抑制的。这个药就是“biomyc－3”。我同学在一个很牛的医院实验室做实验，他们都是用的这个药，而且效果很好。但是有点贵500块钱10ml。
这个药是杀支原体的，所以那个实验室的牛人们倾向于认为黑胶虫是支原体。
大家可以上网查一查这个药。
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发表于 2011-12-8 15:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我有黑胶虫图片，不过没人能肯定它就是，只是几个“老手”看看凭经验断定的。真希望有人能把这东西研究透。
下面说说我“养”的黑胶虫，10％“四季青”胎牛血清+1640,培养箱里培养两天后就是这个样子，个人认为是血清有问题。


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2011-12-8 15:51
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蒲公英[使用道具]
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发表于 2011-12-8 15:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

细胞复苏了两瓶，一瓶长的比较快一点我就先传代了，结果第二天传代的那瓶长了小黑点，棒状，运动能力比较强，有些游动很快，有些在原地快速打转，大多数在原地扭动。而没有传代的那瓶没有发现小黑点，怀疑是胰酶污染。于是我取胰酶放在小平皿里观察发现了小黑点，没有处理，室温放置，第二天观察发现黑点变多。这个有可能是黑胶虫吗？怎么能在胰酶里生长？有可能是别的什么污染吗？（除培养基和胰酶所用其他物品均在前一天消毒过）
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二丫头466[使用道具]
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发表于 2011-12-8 15:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室养的细胞中也出现了做布朗运动的小黑点,但并不影响细胞生长也没有出现过细胞死亡的现象。听昆明动物所的专家说这些小黑点是细胞凋亡后形成的凋亡小体。
我们开始用1640培养细胞时小黑点比较多后来由于1640用完了换成MEM+LH后小黑点明显减少了，所以我觉得可能与培养基有关。
我们实验室以前也出现过“黑胶虫”污染，但是我们污染“黑胶虫”后，传代后第二天培养液就会变黄，在培养液中直径小些的“黑胶虫”做快速转圈运动，直径大的做慢速的摆尾运动。而且可以通过0.22um滤膜。更换血清后就再也没有出现这种情况了。
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乌贼老弟[使用道具]
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发表于 2011-12-8 15:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
同感同感！我们试验室的细胞全面染菌，像极了“黑胶虫”，这家伙很顽固，那都有，我们都无从下手了，上面说过它的直径是0.5-1微米的话，用0.22的滤膜应该能滤掉呀，我在刚买的血清空培养中发现了它，现在根本不敢复苏细胞，快疯掉了

======================================================

0.22能滤掉它的卵么？所以~~~~~~~~而且很可能它可以寄生在细胞内部
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缘yuan[使用道具]
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发表于 2011-12-8 15:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
埃 至今还没有人能够拿出一个可靠的方案来对付所谓的黑焦虫 我是深受其害， 现在实验都没办法做下去了！！
痛苦啊
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baidukk[使用道具]
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发表于 2011-12-8 15:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也遇到了这种情况，我养的A549

开始的时候细胞状态还可以
后来边缘轮廓开始淡化
同时细胞核周围出现细小颗粒（不知道是细胞内容物凸显还是小东西附着在上面）
消化的时候细胞也是圆的
但是边缘相当模糊，有点像小学生画的太阳
而且细胞外好像有长须状的东西（会不会是小东西入侵细胞的方式？）

再然后
细胞就在贴壁的时候被一群晃动的小虫虫吞噬，片甲不留

那些小东西
一开始是小点点，像布朗运动似的活动，也有的像火箭似的游的快极了
后来变的长了一点，就像杆状的微生物，有振动的也有扭动的，在细胞周围
然后就变成绳索状了，基本是小团了（不规则形状）

各位有遇到这种情况的吗?
以前没见过这种污染
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发表于 2011-12-8 15:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们最近也遇到了，细胞内可见明显和黑色小颗粒，细胞表面也有贴附，
胞外培养基内也散在，高倍镜下仔细观察，可见小颗粒做布朗运动。
不知这是什么污染？有什么方法去除？有没可能是支原体污染？
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发表于 2011-12-8 15:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也说两句。
我们学校电脑的网络换了，换了之后网速慢的要死，大家经常反映，学校最后在校内网，发出公告，说部分同学的电脑中毒，导致网速很慢，请同学及时杀毒。我就奇怪了，以前没换网时怎么就没事呢？现在有个怪现象，就是电脑方面的事都喜欢往病毒上靠。
现在在细胞培养上，有个怪现象，什么都喜欢往“黑胶虫”上靠。我不敢否定“黑胶虫”的存在，因为我对他没有太多的了解，没有太多的了解的东西，一般是没有发言权的。但是，它是一个没有肯定，没有明确定义的东西，为什么那么多的战友很肯定的说，自己曾经或者正在被它污染呢？
我看上面群友发了张照片，这很好，我感觉，也是我想说的就是大家都把自己的“黑胶虫”照片帖出来，细胞培养，照片很重要的。我很奇怪的就是，大家说的眉飞色舞，滔滔不绝，怎么就不发照片呢？我是很怀疑的。群友发的照片，我说说我的看法，有很多战友说“黑胶虫”是细胞内的，和细胞关系很紧密的，但群友发的照片上，我没怎么看到细胞呀？是否可以说，很多战友间说得所谓的“黑胶虫”并不相同。
我认为我们做事应该本着实事求是的态度。我刚培养的时候，买来胎牛血清，上面写明未灭活。有资料显示要灭货（56摄氏度，30分钟）。但是我就没灭活，因为我有个疑问，为什么厂家不灭活？他们灭活多简单呀。什么原因呢？如果资料或者胎牛血清上写明：现用灭活效果好的话那也可以理解，但没有这样的字样。那就说不通了，为什么厂家自己不灭活？后来我在丁香园找到了答案，现在一般不主张灭活。
现在“黑胶虫”的问题还没有定论，我们不能否定它的存在，有可能我们很多年后对它有认识，有了解，但也有可能它根本就不存在。我们现在就否定“黑胶虫”是不正确的，但是把什么都说成“黑胶虫”就更不正确了。我的建议是，我这帖以下的说发现“黑胶虫”的战友都把照片帖上来，以前发帖说发现“黑胶虫”的把照片补贴上。
不知大家同意否？
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