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标题:[讨论帖]“黑胶虫”问题

969[使用道具]
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发表于 2011-12-8 16:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

同意楼主说法！但是在我养的6孔板内还发现边缘细胞比中间细胞状态好，黑点点也少！
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月牙牙[使用道具]
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发表于 2011-12-8 16:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我刚复苏的乳腺癌435s细胞，开始长的也还是可以，第二天换液后发现贴壁的细胞少了很多，开始有小黑点了。第三天，肉眼下整个培养基变黄、浑浊，在显微镜下发现整个背景都是模糊的，还有不少小黑点在原地打转。那些贴过壁的细胞看着就像癌症晚期的病人一样，胞膜也不清楚了，胞浆里面很多圆形的小点，也不完全是黑色的，像是一些小气泡。大家帮我分析下，是什么问题啊。现在做培养基的验证。
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yychen[使用道具]
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发表于 2011-12-8 16:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的细胞中也有很多小黑点
不过好像是贴壁的
时间长了，细胞就都死掉了
小黑点越来越多
真是奇怪的
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ladyhuahua[使用道具]
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发表于 2011-12-8 16:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

同意各位说的呀，我养得原代一接种过两三小时观察就出现大片的黑色团状物，原本可以长出突触的神经细胞也不长角了，第二天换液时几乎看不见正常的细胞了，黑黑的一大片，有时候换液后几天情况好点。但是细胞明显感觉营养不够，长的扁扁的。
怎么解决呀，焦虑死了
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flower-201[使用道具]
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发表于 2011-12-8 16:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的细胞株是刚从武大买进的,买来就看见那玩意儿了.打电话问了,他们说查过了,全国的都有;就按一般的培养法培养就可以了;不满意,就请退货.闷啊!:
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BOSS2011[使用道具]
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发表于 2011-12-8 16:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
看到这些，吓出一身冷汗啊！虽然没有污染，不过珍贵细胞一定要冻存保种啊！一定一定！
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one[使用道具]
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发表于 2011-12-8 16:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

今天我在培养成骨细胞的原代时也是突然发现了有类似黑胶虫的东西，而且细胞活力也明显减弱（两天前看时还没有），听从师姐的建议是将培养基完全换掉了，加入含1000单位的PBS反复清洗了两遍后，加入了此PBS在室温下呆了10分钟后，培养基清洗后加入配置好的培养液！现在还是不太放心我的细胞，因为另一名博士后的培养瓶里也发现了类似黑胶虫的东西！！哎呀 实验室的培养箱也应该清洗消毒了！
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发表于 2011-12-8 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

黑胶虫 的现象我也观察到过，但是我发现，细胞状态越好，黑胶虫越少，或是没有。 但是如果诱导细胞成熟，崩解，死亡后，那么黑胶虫就特别特别多，就好像细胞死后的“寄生虫”。
我认为细胞状态是因，而它是果。
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发表于 2011-12-8 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这里还要问一下，胞浆内的黑点和培养基中的黑点不是一回事吧？我刚开始养细胞时，胞浆内有很多小黑点，我查书上说这说明细胞状态不好，后来传代养了一段时间，细胞有的就变的透明些了。不过有时还是会有很多黑点。但是这些黑点并不影响细胞的生长。至于培养基中的黑点，有运动的，也有不运动的，我也没有去理会，细胞照样生长。
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发表于 2011-12-8 16:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也碰到了同样的问题
我养的是CNE-1和CNE-2，上星期复苏两个细胞株时，CNE-1有这种“黑胶虫”，而CNE-2则没有，后来CNE-1基本都不长了，贴壁也越来越差，最后我丢弃CNE-1。一周以后，CNE-2也出现了这样“黑胶虫”，细胞由原来的生长旺盛，形态规则，逐渐变成形态不规整，且胞内出现很多的透亮空泡，而培养基并未见混浊。可惜上次都没留下图。
这次同样复苏两株细胞，和上次一模一模，下面是我养的两株细胞，CNE-1细胞周围出现好多不规则形态的黑色颗粒，在40倍镜下，可发现少量会现原地抖动，用无菌PBS反复吹打都未见好转，反而见细胞脱落。而CNE-2则暂时未发现有此现象。我用的是GIBCO1640+HYCLONE血清，10%。

CNE-1


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2011-12-8 16:04
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