小中大RNA转染(entranster)过程中常见问题与解决方案
问题 可能原因 解决方案
rna与转染试剂比例不佳 预实验优化
转染后沉默 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%
现象不明显 rna 效率不高 选择最优rna,并采用已知高效的rna 做对照
rna 酶污染 建议无rna 酶和内毒素的吸头、离心管和溶液等材料和实验器具。
转染后培养时间不够 在mrna 水平可以到48 小时以后验证结果,在蛋白水平可以到72 小时后验证结果
rna与转染试剂比例不佳 预实验优化
细胞毒性 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%
培养基毒性 采用含10-20%血清的全培养基
细胞污染 建议彻底清洁所有细胞培养相关用品