浅析宫颈癌细胞TC-1在抗肿瘤药物研发上的作用

宫颈癌是一种恶性肿瘤,主要病因是人乳头瘤病毒HPV的持续感染,主要致病型有HPV16HPV18。建立保持人宫颈癌生物学特性的小鼠宫颈癌模型,可以为进一步研究宫颈癌的发病机制和研发治疗宫颈癌的药物提供了非常重要的科研工具。目前应用较多的小鼠宫颈癌模型多为小鼠皮下注射HeLa细胞或CaSki细胞。TC-1 细胞为含有 HPV16 E6 / E7 基因的小鼠肺上皮细胞,通过接种 TC-1细胞也可以构建进行肿瘤实验研究的宫颈癌动物模型。

鼠肺上皮细胞株TC-1、鼠源性的HPVl6阳性的肿瘤细胞株,可以广泛用于宫颈癌的动物实验研究。TC-1 细胞系可持续表达 E6E7 蛋白,具有和宫颈癌细胞相似的生物学行为,使建立鼠宫颈癌原位移植模型成为可能。主要表达在自然杀伤(NK)细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和肠内皮细胞表面的CDl60,可结合配体sHIA-G1后能抑制血管增生,在抗肿瘤治疗中为抑制新生血管形成提供良好分子靶标。

如有研究者将C57BL/6小鼠接种TC-1宫颈癌细胞建立小鼠荷瘤模型,免疫磁珠分选小鼠脾脏细胞获得CD8+T细胞,流式细胞术检测CDl60CD8+T细胞上的表达;流式细胞仪(FACS)分选CD8+T细胞获得CDl60+CD8+T细胞群和CDl60-CD8+T细胞群,将两群细胞分别与肿瘤细胞抗原肽热休克蛋白70(HSP70)-TC-1复合物和去除CD8+T的脾细胞混合,两群混合细胞各分为两组,其中一组同时加入CDl60高亲和力配体单纯疱疹病毒侵入介导子(HVEM)的抗体,刺激培养6 d,羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记法检测CD8+T细胞增殖,流式细胞术检测各组细胞胞内穿孔素和γ-干扰素(IFN-γ)的表达[1]。该研究发现CDl60在荷瘤小鼠的脾CD8+T细胞上表达升高且与其免疫活性功能的下降有关;阻断CDl60HVEM的相互作用,部分逆转了CD8+T细胞的免疫活性的抑制。

TC-1细胞构建的小鼠宫颈癌模型为研究对象,进行抗肿瘤药物研发的研究有很多。如有研究者观察掌叶半夏脂溶性提取物(PE)对正常免疫功能荷瘤小鼠体内免疫的影响[2]。实验选用宫颈癌TC-1细胞株种植于野生型C57BL/6小鼠右侧颈背部皮下,建立正常免疫功能荷瘤小鼠模型,用于模拟正常机体患HPV(+)肿瘤后免疫功能状态的改变。

人类疾病的动物模型是具有人类疾病模拟性表现的动物疾病材料,是实验假说和临床假说的实验基础,构建小鼠宫颈癌模型为研究宫颈癌的发病机制、预防及治疗策略提供了更为宽广的研究基础。美迪西药效部经过多年的经验积累、多方验证和长期实践考验,已经建立了完善的动物模型库,可根据客户的需要提供各种有效的动物模型,用来检测药物的有效性。

也有研究者研究了淫羊藿苷体外对致宫颈癌TC-1细胞的增殖抑制及促凋亡作用。方法是利用细胞培养,用不同浓度的淫羊藿苷在一定的时间处理致宫颈癌TC-1细胞,光学显微镜直接观察药物对细胞的作用;MTT法检测淫羊藿苷对TC-1细胞的增殖抑制作用;Dapi核染色、Annexin v-FITC/PI流式细胞学检测细胞凋亡[3]。该研究发现淫羊藿苷对TC-1细胞增殖有抑制和促凋亡作用,并呈时间浓度依赖性。

[1] CD160的表达与荷瘤小鼠CD8+T细胞免疫活性的关系[J].

[2] 掌叶半夏脂溶性提取物对宫颈癌荷瘤小鼠脾脏免疫的作用[J].

[3] 淫羊藿苷促进宫颈癌TC-1细胞凋亡作用的研究[J].