小中大犬胸主动脉平滑肌贴块法，方法成熟，比消化法好控制的多，要点：
1、取材过程要快，取好放4度储存的D-hanks液带入超净台，不然如liguofan战友所述，先天不足；
2、块大小密度影响不是很大（尽量小），关键是边缘要尽量整齐，选用快刀快剪；
3、一定要贴牢，翻瓶时间个人不一，有3－5小时的，也有贴块直接翻瓶的，关键还是贴牢，另外在贴牢的基础上尽量早接触培液，可以在剪块的时候加少量培液略湿润，镊子夹块到培养瓶后，用吸管之类的细长工具将块均匀铺好，加刚好覆盖组织块的培养液量（25cm2培养瓶大概2ml），半小时到一小时内就可翻瓶，动作要轻，从培养瓶一角试着翻，如果块飘起，则再过会翻；
4、贴块无内膜外膜面之分，亦无需刮除内膜，若内膜面向下，会有少量内皮细胞爬出组织块，但只要平滑肌细胞一旦爬出来，内皮细胞生长自然不占优势，会因为平滑肌细胞大量爬出、增殖而漂起来，换液可洗掉，另外传代可纯化平滑肌细胞。
5、培液Gibco的DMEM（高糖4500mg/L）加四季清新生牛血清20％。
一点点小经验，供各位群友参考。
另外，内皮细胞比较难养，至今没有找到成熟的方法，还望各位群友不吝赐教！
