小中大培养瓶底有像泥沙一样的东西。
血清。
无菌操作。
过滤。
问题:
1、这种情况是不是就是污染?
2、我平时换了培养液,加入培养箱后培养液马上会变得偏黄,不是像在箱外那样的红的或紫红的,但一般并不浑浊,不知这个有没有问题,一直心存疑虑。
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1、泥沙样的东西是支原体污染,特征是培养液不变黄也不变浑浊。
2、支原体污染是不能通过过滤方法去除的的,因为支原体直径0.1um,滤膜一般为0.22um。支原体污染很难去除,如果可以,最好是扔掉不要了,我试过好多方法,现在觉得比较有效的是:环丙沙星。正常抑菌浓度是1:200,杀菌加大浓度即可。
3、一般来讲,操作造成的污染多为细菌污染(可带手套防止,如果不带手套,切记手不能从任何开口的培养瓶、皿等物正上方经过),支原体污染多数为培液和血清来源。新配的培液可放CO2孵箱48小时检测,如果没有污染即可排除培液和血清问题。
4、培液颜色变化是正常的,只要没有浑浊、没有沉淀、没有絮状漂浮物(有些血清有絮状物,是蛋白析出,不是污染)都是正常的,因为细胞本身代谢就会使培液变酸。
祝你和你的细胞们好运!